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Reconstituição de uma proteína transmembrana, a voltagem-Ion Channel, KvAP, em Gigante Unilamelares Vesicles para microscopia e de Patch Estudos Grampo
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Biology
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JoVE Journal Biology
Reconstitution of a Transmembrane Protein, the Voltage-gated Ion Channel, KvAP, into Giant Unilamellar Vesicles for Microscopy and Patch Clamp Studies
DOI:

11:42 min

January 22, 2015

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:44Giant Unilamellar Vesicle Growth by Electroformation
  • 04:29Giant Unilamellar Vesicle Growth by Gel-assisted Swelling
  • 06:07Harvesting and Transferring GUVs
  • 07:33Patch-clamping GUVs
  • 09:14Results: Microscopy and Patch Clamp Studies of KvAP GUVs
  • 11:03Conclusion

Summary

Automatic Translation

A reconstituição da proteína transmembranar, KvAP, em vesículas unilamelares gigantes (GUVs) é demonstrada por dois métodos de desidratação-re-hidratação - eletroformação, e inchaço assistida-gel. Em ambos os métodos, vesículas pequenas unilamelares que contêm a proteína são fundidos em conjunto para formar GUVs que pode, em seguida, ser estudadas por microscopia de fluorescência e de patch-clamp electrofisiologia.

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