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Reconstitution d'une protéine transmembranaire, le Ion canal de voltage-dépendants, KvAP, en géant vésicules unilamellaires pour la microscopie et Patch études Clamp
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Biology
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JoVE Journal Biology
Reconstitution of a Transmembrane Protein, the Voltage-gated Ion Channel, KvAP, into Giant Unilamellar Vesicles for Microscopy and Patch Clamp Studies
DOI:

11:42 min

January 22, 2015

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:44Giant Unilamellar Vesicle Growth by Electroformation
  • 04:29Giant Unilamellar Vesicle Growth by Gel-assisted Swelling
  • 06:07Harvesting and Transferring GUVs
  • 07:33Patch-clamping GUVs
  • 09:14Results: Microscopy and Patch Clamp Studies of KvAP GUVs
  • 11:03Conclusion

Summary

Automatic Translation

La reconstitution de la protéine transmembranaire, KvAP, dans des vésicules unilamellaires géantes (GUVs) est démontrée par deux méthodes de déshydratation-réhydratation, et - électroformation gonflement assisté gel. Dans les deux procédés, de petites vésicules unilamellaires contenant la protéine sont fusionnées ensemble pour former GUVs qui peuvent ensuite être étudiées par microscopie par fluorescence et de patch-clamp électrophysiologie.

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