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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Bacterial Transformation: Electroporation
  • 00:00Overview
  • 00:47The Plasmid
  • 02:17Electroporation Basic Principles
  • 03:26Electroporating Bacteria
  • 07:07Preparing Electrocompetent Cells
  • 09:36Applications
  • 11:43Summary

Transformación bacteriana: Electroporación

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Overview

El término “transformación” refiere a la ingestión celular de ADN extraño. En la naturaleza, la transformación puede ocurrir en ciertos tipos de bacterias. En biología molecular, sin embargo, transformación es inducida artificialmente a través de la creación de poros en las paredes celulares bacterianas. Las células bacterianas que son capaces de tomar ADN del ambiente se denominan células competentes. Espectro de células se pueden producir en el laboratorio y la transformación de estas células se puede lograr mediante la aplicación de un campo eléctrico que crea poros en la pared celular a través del cual el ADN puede pasar.

El video explica el equipo utilizado en la electroporación como una cubeta electroporator y electroporación. El video también pasa a través de un procedimiento paso a paso sobre cómo crear células de espectro y electroporate las células de interés. Predicción del éxito de una transformación de un experimento, mediante la observación de la constante de tiempo, así como la importancia de eliminar la sal de las soluciones cuando electroporating, también se mencionan.

Procedure

Transformación bacteriana es un proceso natural, en el cual las bacterias ingieren ADN extraño y luego amplificarán o clonación. En el laboratorio, este proceso puede ser inducido artificialmente, mediante el uso de pulsos de campo eléctrico de alto voltaje para crear poros en la membrana celular bacteriana, a través de la cual el plásmido ADN puede pasar. La electroporación se refiere a este método y en el siguiente vídeo se demuestra sus principios, procedimiento paso a paso y aplicaciones. <…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Bacterial Transformation: Electroporation. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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