JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Bacterial Transformation: Electroporation
  • 00:00Overview
  • 00:47The Plasmid
  • 02:17Electroporation Basic Principles
  • 03:26Electroporating Bacteria
  • 07:07Preparing Electrocompetent Cells
  • 09:36Applications
  • 11:43Summary

טרנספורמציה חיידקית: אלקטרופורציה

English

Share

Overview

המונח “טרנספורמציה” מתייחס בליעה תאית של DNA זר. בטבע, טרנספורמציה יכולה להתרחש בסוגים מסוימים של חיידקים. בביולוגיה מולקולרית, לעומת זאת, טרנספורמציה מושרה באופן מלאכותי באמצעות יצירת נקבוביות בקירות התא החיידקי. תאים חיידקיים המסוגלים לקלוט דנ”א מהסביבה נקראים תאים מוסמכים. תאים אלקטרו-קומפטנטיים יכולים להיות מיוצרים במעבדה וניתן להשיג טרנספורמציה של תאים אלה באמצעות יישום של שדה חשמלי היוצר נקבוביות בקיר התא שדרכו DNA יכול לעבור.

הסרטון מסביר את הציוד המשמש באלקטרופורציה כגון אלקטרופורטור ואקובט אלקטרופורציה. הסרטון גם עובר הליך שלב אחר שלב על איך ליצור תאים אלקטרו-קומפטנטיים ותאי אלקטרופוראט של עניין. חיזוי של ההצלחה של טרנספורמציה של ניסוי, על ידי התבוננות קבוע הזמן, כמו גם את החשיבות של הסרת מלח מן הפתרונות בעת אלקטרופורציה, מוזכרים גם.

Procedure

טרנספורמציה חיידקית היא תהליך טבעי, שבו חיידקים בולעים דנ”א זר ואז מגבירים או משכפלים אותו. במעבדה, תהליך זה יכול להיות מושרה באופן מלאכותי, באמצעות פולסים שדה חשמלי מתח גבוה כדי ליצור נקבוביות בקרום התא החיידקי, שדרכו DNA plasmid יכול לעבור. Electroporation מתייחס לשיטה זו והסרטון הבא ידגים את עקרונו…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Bacterial Transformation: Electroporation. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos