A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:10Introduction
- 00:42Expression and Purification of Target Protein and Tagged Ubiquitin
- 03:15Immunoprecipitation
- 04:51SDS-PAGE and Immunostaining
- 05:48Detection of Protein Ubiquitination in vitro
- 07:02Representative Results
- 08:22Conclusion
Ubiquitinatie is een belangrijke posttranslationele modificatie uitgevoerd door een set van drie enzymen. Mutaties van genen die betrokken zijn in deze wijziging worden geassocieerd met vele verschillende ziekten bij de mens. We beschrijven hier protocollen aan eiwit ubiquitinatie te detecteren in gekweekte cellen<em> In vivo</em> En reageerbuizen<em> In vitro</em>.
Tags
Protein UbiquitinationPosttranslational ModificationUbiquitin-activating Enzyme E1Ubiquitin-conjugating Enzyme E2Ubiquitin Ligase E3Deubiquitylating EnzymesProtein StabilityCellular LocalizationBiological ActivityGene MutationsHuman DiseasesCancerNeurodegenerationMetabolic DisordersPathogenesisDetection ProtocolsCultured Cells In VivoTest Tubes In VitroSumolyationNeddylation
