يصف هذا البروتوكول طرق تدخل Tuina في نموذج الفئران الناجم عن حقن أحادي يودوأسيتات الصوديوم لالتهاب المفاصل في الركبة (KOA) ، والذي يوفر مرجعا لتطبيق Tuina في النماذج الحيوانية KOA. يدرس هذا البروتوكول أيضا الآلية الفعالة ل Tuina ل KOA، وستساعد النتائج في تعزيز تطبيقها.
يتميز الفصال العظمي في الركبة (KOA) ، وهو اضطراب تنكسي شائع في المفاصل ، بالألم المزمن والإعاقة ، والتي يمكن أن تتطور إلى تلف هيكلي لا يمكن إصلاحه في المفصل. تعتبر التحقيقات في العلاقة بين الغضروف المفصلي والعضلات والغشاء الزليلي والأنسجة الأخرى المحيطة بمفصل الركبة في KOA ذات أهمية كبيرة. حاليا ، تشمل إدارة KOA تعديلات نمط الحياة ، والتمارين الرياضية ، والأدوية ، والتدخلات الجراحية. ومع ذلك ، لا يزال هناك نقص في توضيح الآليات المعقدة الكامنة وراء الألم المرتبط ب KOA. وبالتالي ، لا يزال ألم KOA يمثل تحديا سريريا رئيسيا وأولوية علاجية. تم العثور على Tuina أن لها تأثيرا تنظيميا على الأنظمة الحركية والمناعية والغدد الصماء ، مما دفع إلى استكشاف ما إذا كان Tuina يمكن أن يخفف من أعراض KOA ، الناجمة عن زيادة تنظيم العوامل الالتهابية ، وأكثر من ذلك ، إذا كانت العوامل الالتهابية في العضلات الهيكلية يمكن أن تزيد من تطور KOA.
قمنا باختيار 32 ذكرا من ذكور فأر Sprague Dawley (SD) بشكل عشوائي (180-220 جم) في أربع مجموعات من ثمانية لكل منها: antiPD-L1 + Tuina (المجموعة A) ، النموذج (المجموعة B) ، Tuina (المجموعة C) ، والجراحة الوهمية (المجموعة D). بالنسبة للمجموعات A و B و C ، قمنا بحقن 25 ميكرولتر من محلول أحادي يودوأسيتات الصوديوم (MIA) (4 مجم MIA مخفف في 25 ميكرولتر من محلول ملحي معقم) في تجويف مفصل الركبة الأيمن ، وبالنسبة للمجموعة D ، تم حقن نفس الكمية من المحلول الملحي الفسيولوجي المعقم. تم تقييم جميع المجموعات باستخدام الاختبارات الأقل إلى الأكثر إرهاقا (عتبة الانسحاب الميكانيكية للمخلب ، الكمون الحراري لسحب المخلب ، تورم مفصل الركبة الأيمن ، درجة Lequesne MG ، درجة حرارة الجلد) قبل الحقن و 2 و 9 و 16 يوما بعد الحقن.
هشاشة العظام في الركبة (KOA) هو هشاشة العظام التنكسية الشائعة ، والتي تتميز بالألم المزمن والإعاقة ، وسيؤدي KOA الشديد نسبيا إلى تلف هيكلي لا رجعة فيه للمفصل1. أصبح الانتشار العالمي المرتفع ل KOA تحديا عالميا رئيسيا للصحة العامة 2,3 ، مما يضعف بشكل خطير نوعية حياة المرضى 4,5. أظهرت الدراسات أن KOA يؤثر على أكثر من 260 مليون شخص في جميع أنحاء العالم6. مع شيخوخة السكان ، يصل معدل الانتشار الإجمالي ل KOA في الصين إلى 17.0٪ فوق سن 40 ، مما يضع عبئا ثقيلا على أسر المتضررين 7,8.
وفقا للطب الصيني ، ينتمي KOA إلى فئة “الشلل”9 ، ويربط كلاسيكي الإمبراطور الأصفر للطب الباطني الأوتار والعظام واللحم بالشلل. وبالتالي ، نحن بحاجة إلى الانتباه إلى العلاقة بين الغضروف والعضلات والغشاء الزليلي ، وكذلك الأنسجة الأخرى حول مفصل الركبة في KOA. في الطب الحديث ، يؤدي كل من التهاب العضلات والعظام ، وهما مكونان رئيسيان للتوازن المناعي لالتهاب المفاصل ، إلى تطور ألم KOA. ومع ذلك ، تركز معظم الدراسات على التهاب الغضروف والتهاب الغشاء الزليلي في مفاصل العظام ، وهناك ندرة في المقالات التي تدرس الظواهر الالتهابية في عضلات الهيكل العظمي. لذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من البحث حول دور العضلات الهيكلية في الالتهاب لاكتساب فهم أكثر شمولا ل KOA وتقديم أفكار لطرق علاج أكثر فعالية. في مراجعة للأدبيات ، وجدنا أن تثبيط العامل المرتبط بالمناعة ليجند الموت المبرمج 1 (PD-L1) أدى إلى تفاقم تطور KOA 10,11 وأنه كان هناك تعبير تفاضلي ل IL-15 و FOXO1 في العضلات الهيكلية للمرضى الذين يعانون من KOA12 ، بالإضافة إلى التهاب كبير في العضلات الهيكلية في المرضى الذين يعانون من KOA. والذي ارتبط أيضا بالتغيرات في المشي. لقد ثبت أن العضلات الهيكلية يمكن أن تفرز أيضا عوامل مرتبطة ارتباطا وثيقا بالمناعة الالتهابية مثل IL-6 ، وأن TNF-α يرتبط ارتباطا وثيقا أيضا بمسار PD-L1 و KOA13،14،15.
حاليا ، تشمل العلاجات المتاحة ل KOA التحكم في الوزن ، والتمارين الرياضية ، والأدوية ، والجراحة ، والتي تشمل عادة الحقن داخل المفصل ، والأدوية المسكنة ، والجراحة بالمنظار ، وقطع العظم حول الركبة16. في الوقت الحالي ، لا يمكن إيقاف تطور مرض KOA أو عكسه تماما ، وبدون فهم واضح للآليات المعقدة الكامنة وراء ألم KOA ، فإن مرضى KOA معرضون لخطر الإفراط في استخدام الأدوية المسكنة وارتفاع معدل الآثار الجانبية8. معظم استراتيجيات العلاج فعالة فقط لفترات قصيرة وتركز فقط على التخفيف المؤقت للأعراض بدلا من التسبب في المرض. لذلك ، يظل ألم KOA أولوية وتحديا للعلاج ، مما يشكل تحديا سريريا خطيرا. ومع ذلك ، يمكن أن تحفز Tuina مباشرة عضلات الهيكل العظمي حول المفصل المصاب في علاج KOA ويمكن أن توفر بعض الفوائد. إلى جانب الوصف السابق ، فهو العلاج المثالي لدراسة دور الأنسجة العضلية الهيكلية في KOA، وتوضيح دور الأنسجة العضلية الهيكلية في الالتهاب يمكن أن يوفر أيضا دعما نظريا أفضل ل Tuina of KOA.
أظهرت الدراسات أن العلاج بالتدليك والعلاج بتقويم العظام والتلاعب بالعمود الفقري يمكن أن يساعد في تخفيف الألم واستعادة وظائف الجسم17,18. يمكن أن تعمل هذه التلاعبات على الالتهاب الموضعي وتخفيف التشنجات وتسكين الألم من خلال العمل الميكانيكي الخارجي. يمكنهم تخفيف الألم بعد رأب مفاصل الركبة الكلي ، وتقليل استخدام الأدوية المسكنة ، وتعزيز الانتعاش بعد العملية الجراحية ، وتحسين التوازن الميكانيكي الحيوي19. التدليك السويدي ممكن في علاج هشاشة العظام ويمكن أن يقلل من التوتر ويحسن نوعية الحياة20. وقد سبق التأثير العلاجي لتوينا على KOA بعض الدراسات.
في هذه التجربة ، سوف يستكشف فريقنا ما إذا كان التعبير عن PD-L1 والعوامل الالتهابية ذات الصلة في العضلات الهيكلية يمكن أن يحفز KOA ويعزز تطوره بناء على نموذج KOA الناجم عن MIA في الفئران. كما سيتم تنفيذ Tuina لمعرفة ما إذا كان يمكن أن يخفف من أعراض KOA الناجمة عن زيادة التعبير عن العوامل الالتهابية. سيتم دمج Tuina مع تثبيط PD-L1 لإثبات الارتباط بين مسار PD-1 بوساطة Tuina في التهاب العضلات الهيكلية الذي يؤثر على تطور KOA والألم ، مما يضع الأساس لمزيد من الدراسات متعددة المستويات حول الآليات العلاجية لتدخل Tuina في KOA.
باختصار ، تصف هذه الورقة التحقيق والتفصيل لآليات التهاب العضلات والهيكل العظمي في تطور KOA وآلامه ، وكذلك الآثار العلاجية ل Tuina على KOA، من منظور تعبير عامل الالتهاب المناعي ، جنبا إلى جنب مع المؤشرات السلوكية ذات الصلة ، لتقديم أدلة بحثية حديثة لنظرية “اختلال الأوتار والعظام” في الطب الصيني التقليدي.
تهدف هذه الدراسة إلى تقييم تحسن KOA بعد تدخل Tuina باستخدام مؤشرات سلوكية موحدة والتحقيق في آليات Tuina ل KOA والعلاقة بين العضلات الهيكلية و KOA. على عكس العلاجات الدوائية والجراحية ، فإن Tuina له تأثير تنظيمي إيجابي على الأنظمة الحركية والمناعية والغدد الصماء. يمكن أن يخفف Tuina الالتهاب والألم النات?…
The authors have nothing to disclose.
وتدعم هذه الدراسة المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NO.82105042, 82205302)؛ برنامج شنغهاي للتميز بعد الدكتوراه (NO.2020371) ؛ مؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (NO.2021M692156) ؛ برنامج شنغهاي للإبحار (NO.20YF1450900) ؛ مؤسسة العلوم في مستشفى يوييانغ للطب الصيني التقليدي والغربي المتكامل (NO.2021yygq03). لم يكن للممولين أي دور في تصميم أو تنفيذ أو كتابة الدراسة.
Anti-PD-L1 | Abcam, Cambridge, MA, USA | ab80276 | |
electric von Frey esthesiometer | IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA | ALMEMO 2450 | |
GraphPad Prism 9.0 | GraphPad Software | Software for stastistical analysis | |
monosodium iodoacetate | Sigma-Aldrich Inc | I9148 | Resolved into normal saline for injection |
pentasorbital sodium | Sigma-Aldrich Inc | P3761 | |
Sprague Dawley (SD) male rats | Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd | No. SCXK (Hu) 2017-0012 | |
thermal analgesia tester | IITC/Life Science | Model 390 |