تحليل يستند إلى الخلية أسلوب مستخدمة على نطاق واسع للكشف عن مصل الغلوبولين المناعي المضادة-أكوابورين-4 غ. ويمكن تطبيق هذا الأسلوب للتشخيص السريري والأبحاث العلمية من اضطرابات الطيف البصري المياليني.
غلوبيولين مناعي المضادة-أكوابورين-4 (AQP4) ز (IgG) هو العلامات البيولوجية الأساسية التشخيصية لاضطرابات الطيف البصري المياليني (نموسد). تحليل يستند إلى الخلية (CBA) أسلوب مستخدمة على نطاق واسع لكشف مفتش مكافحة AQP4 في مصل الدم البشري مع حساسية عالية وخصوصية. بإيجاز، المصل مفتش مكافحة AQP4 يتم التقاطها بواسطة الخلية AQP4 transfected ثابتة على biochip ثم الكشف عنها بواسطة جسم ثانوي المسمى فلوريسسين. يستخدم مجهر الأسفار لتصور الأسفار، وشدة الأسفار يتم تقييمها من قبل اثنين على الأقل من الأطباء ذوي الخبرة. يمكن إجراء تشخيص نهائي من نموسد تقوم على المزيج من AQP4 المضادة IgG الكشف عن النتائج والمظاهر السريرية والنتائج نيوروراديولوجيكال. ووفقا للدراسات السابقة، CBA أكثر حساسية وتحديداً من أساليب الكشف عن مفتش مكافحة AQP4 أخرى، وأنه يمكن تطبيقها على كل من التشخيص السريري والدراسات المتعلقة نموسد. يحتوي الأسلوب على القيود؛ على سبيل المثال، لا تزال تفتقر إلى نطاق دولي لتقييم التتر مفتش مكافحة AQP4 المصل. ويرد هنا، بروتوكول مفصل لمصل الدم البشري AQP4 المضادة مفتش الكشف عن استخدام تحليل التكاليف والمنافع.
مفتش AQP4 المصل هو العلامات البيولوجية أساسية تشخيص المياليني البصري طيف اضطرابات (نموسد)1. تحليل يستند إلى الخلية (CBA) أسلوب الكشف عن مفتش AQP4 المضادة مستخدمة على نطاق واسع مع حساسية عالية وخصوصية. هنا، هو عرض بروتوكول مفصل لتحليل التكاليف والمنافع.
AQP4، بروتين قناة مياه، ست وحدات تمتد من الغشاء والمجالين حلزونية المحيطة واحد مائي المسامية2. مفتش مكافحة AQP4 تشارك في الآلية المرضية نموسد من خلال الربط إلى هدفها AQP4، التي تقع أساسا في اندفيت أستروسيتيس3. قد تبين أن مفتش مكافحة–AQP4 إيجابية في حوالي ثلثي المرضى نموسد4. في أحدث معايير التشخيص الدولي نموسد، يعتبر مفتش مكافحة AQP4 العلامات البيولوجية تشخيصية أساسية5. وفي هذا الصدد، من الأهمية بمكان وضع بروتوكول يمكن الاعتماد عليها لاكتشاف مصل الدم البشري مفتش مكافحة AQP4 وتيسير التشخيص السريري نموسد.
حاليا مختلف أساليب الكشف مفتش مكافحة AQP4 المتاحة، مثل المصرف المركزي والتحليل القائم على الأنسجة والمرتبط بالانزيم المرتبط بالانزيم والتدفق الخلوي6،7. وتوظف CBA EU90 الخلايا التي يتم transfected مع AQP4 البشرية، للقبض على مفتش مكافحة AQP4. مفتش مكافحة–AQP4 القبض على الكشف عنها بواسطة الأجسام المضادة الثانوية الفلورسنت وتصور بعد ذلك بالفحص المجهري. تتراكم الأدلة أظهرت أن المصرف المركزي أكثر حساسية وتحديداً من الأخرى المضادة AQP4 كشف مفتش أساليب6،7. ووفقا لتحليل تلوي، حساسية وخصوصية CBA قد تبين أن 76 في المائة و 99 في المائة، التي كانت أعلى من النسيج المستندة والمرتبط بالانزيم المرتبط فحوصات6. وعلاوة على ذلك، تمت مقارنة متعددة المراكز لفحوصات تشخيصية لمفتش مكافحة–AQP4 أجرى7. التحق ما مجموعة 193 دراسة المواضيع من مراكز التشخيص الأوروبية 157. واستخدمت أربعة أساليب مختلفة لكشف مفتش مكافحة AQP4 المصل7. وثبت أن المصرف المركزي كان أكثر حساسية وتحديداً من الأساليب الأخرى7. كما يتم التعبير عن AQP4 باثنين من isoforms الرئيسية (AQP4-M1 و AQP4-M23)، هو ترانسفيكتيد AQP4 المضادة مفتش القبض على خلية مع AQP4 M1 أو AQP4-M23. ومع ذلك، هو أي نوع من القبض على خلية أفضل ما زال مثيرا للجدل. ودعمت التحقيق واحد AQP4-M1 على أساس CBA8، بينما قد أشار آخرون إلى أن أساس AQP4-M23 CBA هو أفضل7،،من910. ومع ذلك، قد تسفر عن CBA AQP4-M23-تعتمد نتائج إيجابية كاذبة بسبب مفتش غير محدد ملزم8. Jarius et al. 11 أفادت بأنه لا يوجد اختلاف كبير في معدلات الكشف عن مفتش مكافحة AQP4 بين AQP4-M1 والتحرشات AQP4-M23-تعتمد.
في موجزة، الأمصال المضادة-AQP4 IgG هو العلامات البيولوجية أساسية نموسد. وقد CBA أعلى من خصوصية وحساسية من أساليب الكشف عن مفتش مكافحة AQP4 أخرى. ويبقى المثير للجدل عما إذا كان AQP4-M1-أو AQP4-M23-تعتمد CBA أفضل. في هذه المقالة، بروتوكول مفصل ل CBA AQP4-M1-تعتمد يرد، التي يمكن أن تنطبق على الدراسات نموسد والتشخيص السريري.
لقد قمنا بوصف طريقة متاحة على نطاق واسع لكشف مفتش مكافحة AQP4 في مصل الدم البشري. مفتش مكافحة AQP4 يرتبط ارتباطاً وثيقا نموسد، وإنشاء أسلوب الكشف عن مفتش AQP4 المضادة موثوق بها أمر حاسم للتشخيص السريري نموسد. أولاً، مفتش مكافحة AQP4 محددة نموسد. التصلب المتعدد هو أيضا مرض المناعة بوساطة من الجهاز ?…
The authors have nothing to disclose.
الكتاب ممتنون للدعم من المنح المقدمة من مؤسسة العلوم الصينية الوطنية (رقم 31600820)، وأن الصحة ولجنة تنظيم الأسرة لمقاطعة جيلين (لا 2016Q036)، والعلم والتكنولوجيا تخطيط المشروع من مقاطعة جيلين (رقم 20180520110JH).
Anti-aquaporin-4 IIFT | Euroimmun | FA 1128-2005-50 | Contains biochip slides coated with AQP4-M1 transfected and untransfected EU 90 cells, fluorescein-labelled anti-human IgG, anti-AQP4 antibody as positive control, antibody negative sample, salt for PBS pH 7.2, Tween 20 and embedding medium. |
CellSens Dimension | OLYMPUS | N/A | photograph software |
Gel & clot activator tube | Improve medical | 623040202 | From a local Chinese company |