We presenteren een protocol om te induceren en te detecteren CMHs veroorzaakt door LPS injectie bij Sprague-Dawley ratten, die kan worden gebruikt in de toekomst onderzoek onderzoek naar de pathogenese van CMHs.
Cerebrale microhemorrhages (CMHs) komen vaak voor bij oude patiënten en zijn gecorreleerd aan verschillende neuropsychiatrische aandoeningen. De etiologie van CMHs is complex, en neuroinflammation wordt vaak waargenomen als een co voorkomen. Hier beschrijven we een sub acute CMHs rat model geïnduceerd door injectie van het lipopolysaccharide (LPS), evenals een methode voor het opsporen van CMHs. systemische LPS injectie is relatief eenvoudig, economisch en kosteneffectieve. Een groot voordeel van LPS injectie, is zijn stabiliteit voor het opwekken van ontsteking. CMHs veroorzaakt door LPS injectie kon worden opgespoord door bruto observatie, haematoxyline en eosine (HE) kleuring, Perl’s Pruisische kleuring, Evans blauw (EB) dubbel-labeling en magnetische resonantie beeldvorming-gevoeligheid gewogen imaging (MRI-Zwi) technologie. Ten slotte worden andere methoden van de ontwikkeling van diermodellen CMHs, met inbegrip van hun voordelen en/of nadelen, ook besproken in dit verslag.
Klassieke cerebrale microhemorrhages (CMHs) verwijzen naar gerelateerde kleine deposito’s van bloed afbraakproducten zoals Hemosiderine van rode bloedcellen in de hersenen-1. Volgens de studie Rotterdam Scan kan CMHs worden gevonden in bijna 17,8% van de personen in de leeftijd 60-69 jaar en 38,3% in die meer dan 80 jaar2. De prevalentie van CMHs bij ouderen is relatief hoog, en een correlatie tussen de accumulatie van CMHs en cognitieve en neuropsychiatrische dysfunctie geweest gevestigde3,4. Verschillende dierlijke modellen van CMHs hebben onlangs gemeld, met inbegrip van knaagdier modellen geïnduceerd door type IV collagenase stereotaxic injectie5, APP transgene6, β-N-methylamino-L-alanine blootstelling7en hypertensie8, met CMHs geïnduceerd door systemische ontsteking als een van de meest goed geaccepteerde keuzes. Fisher et al. LPS afgeleid van Salmonella typhimurium 9 eerst gebruikt voor het ontwikkelen van een acute muismodel van CMHs. Later, dezelfde groep gemeld de ontwikkeling van een sub acute CMHs muismodel met behulp van de dezelfde benadering2.
LPS is beschouwd als een gestandaardiseerde inflammatoire prikkel via intraperitoneale injectie. Eerdere studies hebben bevestigd dat LPS injectie neuroinflammation veroorzaken kan, zoals blijkt uit de grote hoeveelheid microglia en Astrocyt activering in dierlijke2,10 modellen. Bovendien was het een positieve correlatie tussen de activering van de activering van het neuroinflammation en het aantal CMHs gevestigde2,10. Op basis van deze eerdere studies, werden we gevraagd om een CMHs rat model te ontwikkelen door intraperitoneale injectie van LPS.
Voorschotten in detectie technologieën hebben geresulteerd in een toename van het aantal onderzoeken van het onderzoek op CMHs. De meest algemeen erkend methoden voor het opsporen van CMHs omvatten de detectie van de rode bloedcellen door de haematoxyline en eosine (HE) kleuring, ijzer(III) ijzer detectie door Pruisisch blauw kleuring9, detectie van Evans (EB) afzetting door immunofluorescentie blauw beeldbewerking en 7.0 Tesla magnetische resonantie beeldvorming-gevoeligheid gewogen beeldvorming (MRI-Zwi)10. De huidige studie is gericht op het ontwikkelen van een methode van screening voor CMHs.
In de afgelopen jaren toegenomen onderzoeken op CMHs. Het mechanisme van CMHs blijft echter onduidelijk is, te vragen wetenschappers om dierlijke modellen die deze bijzondere voorwaarde te simuleren. Bijvoorbeeld, Hoffmann et al. een hypoxie-geïnduceerde CMHs muismodel ontwikkeld dat laat zien dat CMHs worden veroorzaakt door hypoxie en verstoring van cerebrovasculaire autoregulatie12. Reuter et al. 5 een CMHs model in APP23-transgene muizen, waaruit blee…
The authors have nothing to disclose.
Wij danken leraar Jian Feng Lei en collega’s uit de hoofdstad Medizinische Universität voor begeleiding tijdens de MRI. Wij danken ook Jing Zeng van de afdeling Neurologie, de tweede Volksrepubliek ziekenhuis van Yichang voor het verstrekken van technische ondersteuning.
LPS | Sigma-Aldrich | L-2630 | for inflammation induction |
EB | Sigma-aldrich | E2129 | for EB leakage detection |
DAPI dying solution | Servicbio | G1012 | count medium for IF |
Perl’s Prussian staining | Solarbio | G1424 | Kit for Prussian staining |
HE staining | Solarbio | G1120 | Kit for HE staining |
chloral hydrate | Sigma-Aldrich | 47335U | For anesthesia |
phosphate buffer saline (PBS) | Solarbio | P1022 | a kind of buffer solution commonly used in experiment |
0.9% saline solution | Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., China | solution for perfusion | |
paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | 158127 | a kind of solution commonly used for fixation |
20% sucrose solution | Solarbio | G2461 | a kind of solution commonly used for fixation |
30% sucrose solution | Solarbio | G2460 | a kind of solution commonly used for fixation |
vet ointment | Solcoseryl eye gel, Bacel, Switzerland | for rat's eyes protection |