실험실 토끼에 하드 진드기 감염의 다양 한 모델

Summary

우리는 단단한 진드기 실험실 토끼에 먹이를 간단 하 고 다재 다능 한 시스템을 개발 했습니다. 우리의 힘 드는 비 프로토콜 쉽게 액세스할 수 재료를 사용 하며 다양 한 실험 설정의 요구 사항에 따라 조정 될 수 있다. 메서드를 사용 하면 편안 하 게 모니터링 및 수 유 기간 틱의 샘플링 수 있습니다.

Abstract

틱 연구에 있는 동물의 사용은 다양 한 하드 틱 식민지의 유지 보수를 포함 하 여 실험실에서 실험 목적에 대 한 중요 합니다. 틱에서 (계란)를 제외 하 고 모든 발달 단계는 hematophagous, 하 고 그들의 수명 주기의 성공적인 완료에 대 한 필수적입니다 때 그들의 척 추가 있는 호스트에 연결 된 혈액 식사를 취득 합니다. 여기 토끼에 단단한 진드기의 먹이를 쉽게 열 수 있는 캡슐을 사용 하는 간단한 방법을 설명 합니다. 제안된 된 방법의 이점은 그것의 간명, 짧은 기간 및 특정 실험 요구 사항을 요구에 가장 중요 한 것은 다양 한 조정 포함 한다. 메서드를 사용 하면 가능 하 게 (다양 한 크기)의 여러 챔버를 사용 하 여 여러 단계 또는 다른 실험적인 그룹의 전반적인 동물 요구를 줄이면서 먹이 허용 같은 동물에. 비 자극 하 고 쉽게 액세스할 수 재료를 사용 수 수 쉽게 실험에서 발견 및 입양에 대 한 제공 또는 재사용 윤리적인 프로토콜 허용 하는 경우 동물에 불편을 최소화 합니다.

Introduction

단단한 진드기 (Ixodidae) 느린 먹이 절지동물으로 잘 알려져 있으며, 몇 일 동안 호스트에 연결할 수 있습니다 또는 주, 종에 따라 발달 단계¹. 이러한 의무 hematophagous 절지동물 다양 한 박테리아, 원생 동물, 바이러스 등 전염 성 요원의 벡터 이며, 따라서 인간과 동물 건강¹에 상당한 위험을 제시. 때 틱 생물학을 공부 하거나 평가 하는 새로운 제어 방법, 먹이 체계는 효과적인 틱의 설립은 효과적으로 실험을 디자인 하 고 연구의 목적은 달성 중요 합니다. 최근, 여러 인공 틱 먹이 시스템 (살아있는 동물의 사용을 피하고) 개발된^2,,34 이었고 그들은 가능한 사용 해야 합니다. 그러나, 이러한 시스템 틱 살아있는 동물에 먹이 완전히 대체할 수 없어 그리고 그들은 과학적 연구에 필요한 많은 생리 조건에 대 한 적절 한 대체 되지 않습니다. 따라서, 어떤 경우에 실험 동물 호스트의 사용은 실험 결과의 관련성을 보장 하기 위해 중요 합니다.

실험실 뉴질랜드 토끼 여러 ixodid 틱 종^5,6,7,,89에 대 한 가장 적합 한 하 고 액세스할 수 있는 호스트를 나타났습니다. 틱 토끼에 먹이의 두 가지 일반적인 전략이 자주 사용 되었습니다: a) 면 천이나 양말^6,7, 덮여 토끼 귀에 먹이 그리고 b) 먹이 면 가방⁹, 나일론 병¹⁰ 또는 내 오프 렌 실¹¹ 토끼의 뒤에 붙어. 토끼의 귀에 먹이 우아한 시스템 때문에 아니다 특히 초기 단계, 애벌레 (nymphs) 진드기 수 크롤 링 하 고 외가도, 동물에 대 한 불편 하 고 틱 먹이의 복구의 모니터링에 깊은 연결 부풀어 오른 틱 어려운입니다. 이 시스템은 또한 대표 하는 동물에 대 한 상당한 불편 엘리자베스 칼라, 보호 양말에 의해 완전히 포함 하는 귀에 두 틱 그룹에 제한. 다른 시스템^9,10,11 는 확실히 더 고급 하드 틱 식민지 유지 보수에 적합. 그러나, 그들은 먹이 챔버의 크기/모양 대 뿐만 아니라 토끼에 실험 그룹의 숫자에 제한 됩니다. 또한, 이러한 프로토콜은 종종 다리 긁 고 손질을 방지 하기 위해 엘리자베스 목걸이의 사용을 피하기 위해 후면 토끼 다리를 절 필요 합니다.

여기 우리는 엘리자베스 목걸이 필요 없다 또는 실험 기간 동안 다리를 절 재킷, 다시 적용 하는 토끼에 붙어 폐쇄 실에서 단단한 진드기의 여러 그룹을 먹이, 힘 드는 비 간단 하 고 매우 효과적인 방법을 제안 합니다. 특히, 우리의 시스템을 에틸렌-비닐 아세테이트 (EVA) 거품 시트 모기 망 하 고 빠른 응고 (3 분) 비 자극 하는 라텍스 접착제로 다시 면도 토끼에 붙어에서 만든 탄성 캡슐을 사용 합니다. 이 기술은 원하는 크기 또는 모양, 여러 캡슐의 첨부 파일을 허용 하 고 실험 후 몇 주 동안 토끼는 완. 시스템은 주로 nymphal 및 성인 하드 틱 단계에 적합 하지만 약간 수정 그것 애벌레도 먹이 대 한 사용할 수 있습니다. EVA 거품 기반 방법 하드 틱 먹이 척추 호스트, 예 양 (는이 종이에 대안 중 하나로 표시 됩니다)의 다른 유형에 적응 수 있습니다.

Protocol

참고:이 연구에서 토끼 유지 되었다 음식 표준 장에 고 광고 libitum 음식, 환경 및 산업 보건 및 안전 (ANSES) 공인 동물 시설 Maisons-Alfort, 프랑스에서의 프랑스 기관에서 제공 하는 물. 동물 두 번 매일 어떤 비정상적인 피부 반응, 건강 문제 또는 합병증에 대 한 두 명의 경험이 풍부한 기술자에 의해 감시 되었다. 실험 방 진드기의 우발적인 탈출을 피하기 위해 더블 양면 테이프와 출입구의 내?…

Representative Results

여기 우리가 처음으로 하드 체크 EVA 폼에 먹이의 상세한 단계-의해 단계 방법 제안 면도 토끼의 뒤에 적용 하는 캡슐 자 켓 (그림 1 및 그림 2)에 의해 보호. 이 프로토콜은 다양 한 종류의 실험에 적합 때 동일한 호스트에 다른 틱 그룹이 필요 하 고 단단한 진드기의 대량 양육을 위해 또한 사용 될 수 있습니다. 먹이…

Discussion

이 전체 프로토콜의 가장 중요 한 단계 면도 피부에 단단히 캡슐 접착제입니다. 이러한 이유로, 적어도 3 분 동안 일정 한 압력은 모서리에 특히 중요 합니다. 그것은 그들을 적용 하는 것이 중요 때 캡슐에 틱 접종, 동안을 피하기 위해 틱 탈출 씰링 오픈에서 반대 구석으로 깊은. 실험을 계획할 때 모든 캡슐 씹는 또는 긁 적 손상을 방지 하려면 재킷에 의해 보호 됩니다 있는지 확인 합니다. 재킷?…

Materials

New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg)	Charles River	Strain Code 571
Rambouillet sheep	Local provider-tick free farm	Female 6 months old
EVA foam 5 mm thick	Cosplay Shop	EVA-PE451kg (950mm x 450mm)	10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species
Foam Sheet 9" X 12" 6 mm-White	Amazon	FOAMSHT6-20	6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop
Full length rabbit jackets	Harvard Apparatus, Inc.	620077- medium, 6270078 – large
Non-toxic latex glue	Tear mender	Fabric & Leather Adhesive
Tubular cotton orthopedic stockinette	BSN Medical	9076 (12-15 cm wide)
Mosquito mesh	Loisirs Creatifs	Very fine filter nylon mesh fabric	Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable.
Leukoplast	BSN medical S.A.S	LF 72361-02
Adhesive hook-and-loop tape	AIEX store	AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour	Fullfiled by Amazon
Fast drying glue	Fixtout	Superglue