ただし、異翅亜目の多くの昆虫 (昆虫綱: 半翅目) は毒、毒組成とその毒の毒素の機能はほとんど知られてないです。このプロトコルでは、さらに特性評価、電気刺激、嫌がらせや腺の解剖を使用してのかめむし類の毒を収穫する方法について説明します。
かめむし類昆虫サシガメ (サシガメ科) や巨大な水のバグ (タガメ) などの捕食性と毒の先祖から子孫し、現存する heteropterans の大半は、この栄養戦略を保持します。いくつかの heteropterans は、脊椎動物の血を主食に移行した (キスのバグ、クロタマゴバチ; などとベッドのバグ、Cimicidae) 餌植物 (ほとんどの Pentatomomorpha) に戻っている他の中。ただし、唾液キスのバグが吸血、少し容易にするために使用を除いてかめむし類の毒クモ、サソリやヘビの毒に比べてについて知られています。
かめむし類の毒の毒素の解析への 1 つの障害は、構造と両方は形態学的に複雑な複数の生物学的役割 (防衛、獲物のキャプチャ、および口腔外消化) を実行毒/口唇腺の機能です。この記事ではカメムシ毒を収集するを用いて正常に 3 つの方法をについて説明します。まず、便利な方法は頻繁に注入されるときに致命的な毒を収集する捕食動物、腺組織で汚染がなくなると電気刺激を示します。第二に、動物の穏やかな嫌がらせが毒テングや heteropterans のいくつかのグループで吐く毒から押し出しを生成するのに十分であることを示します。第三に、我々 は毒液腺を取得する麻酔動物の解剖によって毒の毒素を収穫する方法を説明します。この方法は他の方法を補完するものではなく電気刺激と嫌がらせが効果的なイチイから毒素の収穫を可能性があります。これらのプロトコルは、研究者かめむし類の構造機能解析と応用医学と農業の昆虫から毒素を収穫する有効になります。
かめむし類の毒は、強力生理活性物質1です。たとえば、キスのバグ (クロタマゴバチ)、ベッドのバグ (Cimicidae) などのカメムシの吸血の毒/唾液分泌を容易に止血2を破壊して給餌。これらの毒の毒素は、凝固、血小板凝集と血管収縮、痛みなど複数の経路をターゲットし、経路をかゆみ。他のほとんどのかめむし類種から毒は吸血するのではなく、捕食を容易にするために合わせられます。その毒は、麻痺、死および無脊椎動物3,4に注入する組織の液状化を引き起こします。脊椎動物に注入される毒液抜本的な効果はあります。例えば、脊椎動物にサシガメHolotrichius innesiから毒の注入により痛み、筋麻痺、出血;このバグによってマウス envenomated は呼吸麻痺5のためすぐに死にます。
トランスクリプトームおよびプロテオーム研究は、いくつかのかめむし類の毒のタンパク質組成を明らかにしました。捕食性の種の毒は、プロテアーゼ他酵素とペプチド及びタンパク質の未知構造と機能6,7、8に富んでいます。バグ キス毒は、血液凝固、血小板凝集や血管収縮2,9メンバーに深く影響を与える triabin タンパク質ファミリーが豊富です。ただし、どの毒素の根底にある毒のほとんどの生物活性は知られていません。たとえば、キス バグブラジルサシガメ ジャガイモの毒は、鎮痛剤、ナトリウム チャンネル10を阻害すると報告されているが、解明する責任のコンポーネントが残っています。同様に、どのコンポーネントのサシガメ毒麻痺や痛みの原因は知られていません。特定毒生物活性と構造と、新しい毒の毒素の機能を特徴づける担当の毒素を識別するための前提条件は、毒を得ています。
電気5,6,7,8,11,12,13守備の挑発が毒を heteropterans から入手します。応答4,8、機械的に圧迫、胸郭12,14,15,16毒液腺8,17 を解剖 ,18,19,20,21,22、および23ムスカリン性アセチルコリン受容体のアゴニストのアプリケーション。2 つの独立したルーメン、前方メイン腺 (AMG) と後部主な腺 (PMG) 主な腺から成っているかめむし類の毒腺の形態は複雑に潜在的な長所と短所の任意のメソッドを判断として付属腺 (AG) を関連付けられています。これらの異なる腺コンパートメント獲物の捕獲や防衛、口腔外消化8,17を含むさまざまな生物学的機能特化する可能性があります異なるタンパク質の分泌物を生成します。Peiratine と ectrichodiine の暗殺者バグで AMG は獲物の捕獲および口腔外消化17PMG に関連付けられています。しかし、harpactorine の AMG8防御毒を分泌する仮説があるに対し、 Pristhesancus plagipennis PMG のバグは獲物の捕獲や消化を特化されています。AG は、サシガメ8小さな分泌機能を持つ、巨大な水のバグ23プロテアーゼ ストレージの主要なサイトに記載されています。明らかに、さらに作業は様々 なカメムシ サブグループ間で各腺区画の機能を明らかにする最も毒の毒素の機能を決定する必要があります。本報告ではこの目標に向かって heteropterans から毒の毒素を収穫するためのプロトコルについて述べる。
サシガメ毒を収穫の最も重要なステップは、研究の目的に応じて適切な方法を選択します。かめむし類の毒を収穫のために提示する 3 つの方法のそれぞれが長所と短所下流のアプリケーションに応じて。
テング (プロトコル 1-3) から毒を追放するバグを誘発する腺組織で毒の汚染を回避します。さらに、これらのメソッドは非殺傷、バグズ ・ ライフのコースで何度も繰?…
The authors have nothing to disclose.
我々 は金融を認めるオーストラリア国立保健・医学研究評議会 (主要研究員、オーストラリアの研究評議会 (助成金 DP130103813 と G.F.K.、EABU に DECRA 交わり DE160101142 に LP140100832) からサポートG.F.K. に APP1044414)、クイーンズランド大学 (A.A.W. に員) など。
Electostimulator | Grass Technologies | S48 Square Pulse Stimulator | Electrostimulator allowing pulsed electrostimulation |
Featherlight tweezers | Australian Entomological Supplies | E122B | For handling live venomous insects |
Protease inhibitor cocktail | Sigma | 4693124001 | For preventing autoproteolytic digestion of venom |
Dissection equipment | Australian Entomological Supplies | E152Micro | For fine dissections |
Insect pins | Australian Entomological Supplies | E162 | For fine dissections |