Aortopathy β-アミノプロピオニ トリルによる大動脈瘤と解離のマウスモデルでのマイクロ CT 定量分析
Summary
放射線不透過性鉛ベースのシリコーンゴムを使用して大動脈径の大動脈瘤マウスモデルで定量化のためマウスの血管を灌流する詳細な方法について説明します。
Abstract
大動脈瘤および解離重大な罹患率と死亡率の人口に関連付けられて、非常に致命的なことができます。大動脈疾患の動物モデルが存在している間、血管系の生体内イメージングは制限されています。大小の船舶をイメージングの最寄りのモダリティとして浮上しているマイクロ コンピューター断層撮影 (マイクロ CT) 近年、体内と体外の両方。血管鋳造の方法と組み合わせて、正常に周波数と β アミノプロピオニ トリル扱わ C57/Bl6 マウスの大動脈の病変の分布を特徴付けるマイクロ CT を使用している私たち。このメソッドの技術的な制限には、貧しい人々 の動物の準備、容器サイズの定量化のための適切な方法論の適用とこのプロシージャの存続性によって導入された灌流の品質のバリエーションがあります。この記事は、鉛ベースの放射線不透過性シリコーン ゴム動脈瘤マウスモデルにおける aortopathy の定量的な特徴づけの血管内血流の方法論を詳しく説明します。大動脈の病理学を可視化、に加えて他の体内血管ベッドまたは事後削除血管のベッドを調べるこのメソッドを使用可能性があります。
Introduction
大動脈解離の発症率は1年ごとの 100,000 ごとの 3 例です。大動脈解離や動脈瘤疾患アカウント以上 10,000 の死のためアメリカ合衆国で毎年、欧米2のすべての死の 1-2% を占めます。大動脈解離は、生理学的な圧力の下で大動脈壁の層を介して血液の伝播と容器の内膜層に涙によって開始されます。高い患者の脈圧は郭清の合併症発生率の増加に関連付けられます。高められた壁面せん断応力は、動脈瘤形成3,4につながる大動脈壁の拡張に関連付けられます。大動脈解離の影響は、脳、腎臓、腸と手足、慢性脳動脈瘤、破裂、または死5,6、7の形成を含む遠隔臓器への血流の閉塞を含まれます。
現時点では、生化学的・細胞プロセスを開始、大動脈瘤と解離の進行に関与するはまだよく理解されています。大動脈瘤と解離の再現可能な動物モデルは、自分の病態を理解するための鍵です。Β-アミノプロピオニ トリル (BAPN) は、エラスチンとコラーゲンの架橋結合を防止し、血管壁の細胞外マトリックスとその生体力学的整合性6の構造を大きく変更するが示されている、リジルオキシダーゼ酸化酵素阻害剤 8。BAPN で治療の齧歯動物は、大動脈瘤や解離9,10の共通動物モデルとして利用されています。
血管の画像診断装置は、血管病変を識別する、血管の開存性を確認して臓器灌流の評価に尽力されます。最近、マイクロ コンピューター断層撮影 (マイクロ CT) はマウスと同様に大きさで分類された動物の血管系の研究に利用されています。腔内の血液が本質的に比較的 radiolucent 骨とは違ってコンピューター断層撮影による血管軸の画像に制限が。血管内の造影剤と組み合わせた場合、ただし、マイクロ CT はマクロ解剖学的血管病理11の研究のための動物の生の詳細な三次元再構成できます。
選択した造影剤 (材料の表を参照) は、クロム酸鉛と硫酸鉛を含む放射線不透過性シリコーンゴム。触媒の存在下で灌流は、時にすばやく背景組織と対照をなして高放射線不透過性血管を作り、血管のマクロ解剖学的アーキテクチャの最小限の変更で血管のキャストを形成する硬化時radiographically を検討しました。この造影剤は、扱いやすい、組織の低下と血管キャスト腐食に伴う破損による容器の損失を避けるために便利です。それは、最小限の収縮12治療法、血管血のクリア特許のまま、非生存実験動物マクロ血管の正確な評価を可能にします。前の仕事はさまざまな動物実験で放射線不透過性シリコーン ゴム コントラストを使用して正常に。具体的には、冠動脈、糸球体、胎盤、および脳循環11,12,13,14,15の可視化に適用が示されています。本稿で我々 はマイクロ CT からマウス モデルにおける BAPN による大動脈病理学の特徴を定量的に鉛ベース放射線不透過性シリコーンゴムの血管内血流を開いて左心室穿刺の方法論を詳細します。
Protocol
Representative Results
Discussion
マイクロ CT イメージングは、動物モデルにおける血管病変の詳細かつ三次元復元を提供するために使用できます。血管内の造影のメディアを使用して強化しているものと非強化の軟部組織など、血管の内腔を区別できます。レーザー ・ ドップラー、微小血管造影、磁気共鳴血管造影、共焦点、または 2 光子顕微鏡を用いた組織学は血管ベッドを評価するために使用可能性があります、彼ら?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
放射線イメージングして彼の支援のマーク ・ スミスに感謝したいと思います。この作品は、心血管疾患 (BOA)、アメリカ心臓協会 (SMC)、NIH R35 グラント (DKS) の学際的な研究の NIH T32 グラントによってサポートされます。
Materials
| Microfil | Flow Tech, Inc | MV-122 | We use yellow, a different color can be ordered as desired. Kit includes MV-Compound, MV-Diluent, and MV-Curing Agent. |
| Heparin (1000 U/mL) | Sagent Pharmaceuticals | 25021-400-10 | |
| Phosphate buffered saline | Corning | 21-031-CV | |
| Isoflurane | Vet One, MWI | 502017 | |
| 3-Aminopropionitrile fumarate salt | Sigma-Aldrich | A3134 | |
| Single syringe pump | Fisher Scientific | 14-831-200 | |
| 27-gauge scalp vein set needle | Exel Int | 26709 | 27G x 3/4", 12" tube |
| Inveon Micro-CT scanner | Siemens Medical Solutions | ||
| Osirix MD | Pimxmeo SARL | Version 8.0.2 | |
| Inveon Research Workplace | Siemens Medical Solutions | Version 4.2 | |
| Rodent Chow | Harlan Teklad | 2018sx |
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