Основной протокол для оценки токсичности химических веществ в модель животного, Caenorhabditis elegans, описан. Метод является удобным и полезным для развития фармацевтических препаратов, а также для оценки риска различных загрязнителей окружающей среды.
Токсикологические оценки имеет решающее значение для понимания воздействия химических веществ на живые организмы в фундаментальных и прикладных биологических наук. Не млекопитающих почвы круглый червь, Caenorhabditis elegans, является ценным модельный организм для токсикологических исследований из-за его удобства и отсутствие животных этики вопросов по сравнению с системами, млекопитающих животных. В этом протоколе описывается подробная процедура токсикологической оценке химических веществ в C. elegans . Противоопухолевых лекарств, этопозид, который предназначен для человека топоизомеразы II и подавляет репликацию ДНК человеческих раковых клеток, был выбран в качестве модели тестирования химической. Возраст синхронизированы C. elegans яйца были подвержены диметилсульфоксида (ДМСО) или этопозид, а затем рост C. elegans контролируется каждый день в течение 4 дней наблюдения стерео Микроскоп. Общее количество яиц проложен от C. elegans относились с ДМСО или этопозид также учитываются с помощью стерео Микроскоп. Этопозид лечения существенно повлияло на рост и воспроизводство C. elegans. Для сравнения из общего числа яиц от червей с периодами лечения различных химических веществ, может решил, что репродуктивная токсичность химических веществ на воспроизведение C. elegans является обратимым или необратимым. Эти протоколы могут быть полезны для разработки различных наркотиков и оценки риска экологических токсикантов.
Токсикологическая оценка имеет важное значение для развития фармацевтических препаратов, пищевых добавок, и космецевтики, а также оценке риска различных экологических токсинов. Грызун модель является одним из самых популярных в естественных условиях экспериментальных систем для этого исследования токсикологии; Кроме того также широко используются организмов не млекопитающих, таких как C. elegans . Non млекопитающих токсикологической оценке модели являются полезными ввиду не только животных этические вопросы, но и их удобство и полезность рассмотрения эффективности затрат, ремонтопригодность, скорость и воспроизводимость1,2 ,3,4.
C. elegans, почвы круглый червь, была использована как модель животных в различных фундаментальные и прикладные исследования по биологии и химии. Это 1 мм длиной, прозрачный нематода, который просто ведется в твердом или жидком нематода роста СМИ (НГМ) кормили с бактериальный штамм кишечной палочки ОР50. C. elegans имеет короткий жизненный цикл, и одичал тип N2 C. elegans откладывает примерно 300 яиц. Таким образом он легко размножается использоваться как экспериментальные материалы3,4,5. C. elegans также широко используется в токсикологических исследованиях многих лекарств и загрязняющих окружающую среду6,,78,9.
Потому что многие противораковые препараты целевых быстро делящиеся раковые клетки, они также могут повредить быстро делящихся нормальные клетки костного мозга, кишечного эпителия и клеток волосяного фолликула. Например тормозящий противораковые препараты топоизомеразы целевой процесс репликации ДНК раковых клеток; Таким образом они также тормозят, быстро делящихся нормальные клетки. Каждый живой организм имеет топоизомеразы и эти топоизомеразы ингибиторы скорее воздействия окружающей среды экосистем6,10,11. Таким образом платформа токсикологической оценке наркотиков, используя модель животного является ценным для развития фармацевтики и оценки экологических рисков.
В этой статье мы опишем подробные протоколы для проверки на токсичность этопозид, которая является клинической противораковый агент что цели топоизомеразы II, как модель токсичных химических веществ в C. elegans. Для этой цели мы будем описывать метод измерения размеров тела и общее количество яиц в C. elegans относились с Этопозид.
В этой статье мы опишем оценки токсичности химических веществ в C. elegans, почвенных нематод, используя этопозид токсиканта примером. Для этой цели мы использовали два экспериментальных условиях. В первом наборе C. elegans были выращены на этопозид, содержащие пластины от яйца до ста?…
The authors have nothing to disclose.
Это исследование было поддержано интрамуральных исследовательский грант Корейский институт науки и технологии (2E27513) и высокую добавленную стоимость продовольственной технологии развития программы (IPET) финансируется министерством сельского хозяйства, продовольствия и сельских дел (315067-03).
Agar | Affymetrix, USA | 10906 | |
Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
Cholesterol | Sigma, USA | C3045 | |
Dimethyl sulfoxide | Sigma, USA | D2650 | |
Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
Etoposide | Sigma, USA | E1383 | |
Image J software (ver 1.4) | Natinoal Institute of Health, USA | https://imagej.nih.gov/ij/ | |
Microscope camera | Jenopitk, Progress Gryphax, Germany | ||
Peptone | Merck, USA | 107213 | |
35 × 10 mm Petri dish | SPL Life Sciences, South Korea | 10035 | |
90 × 15 mm Petri dish | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
Stereo microscope | Nikon, Japan | SMZ800N | |
Yeast extract | Becton Dickinson, USA | 212750 |