ويرد وصف بروتوكول أساسية لتقييم سمية المواد الكيميائية في حيوان نموذج، ايليجانس كاينورهابديتيس،. الطريقة مريحة ومفيدة لتطوير المستحضرات الصيدلانية، وكذلك فيما يتعلق بتقييم المخاطر من الملوثات البيئية المختلفة.
تقييم السمية أمر حاسم لفهم آثار المواد الكيميائية على الكائنات الحية في ميادين العلوم البيولوجية الأساسية والتطبيقية. طبقة من تربة غير الثدييات جولة دودة، ايليجانس كاينورهابديتيس، كائن نموذج قيمة لدراسات علم السموم نظراً للراحة وعدم وجود قضايا الأخلاقيات الحيوانات بالمقارنة مع نظم الحيوانات الثديية. ويرد في هذا البروتوكول، إجراء مفصل لتقييم السمية للمواد الكيميائية في C. ايليجانس . دواء السرطان سريرية، اتوبوسيدي، الذي يستهدف topoisomerase الإنسان الثاني، ويحول دون تكرار الحمض النووي من الخلايا السرطانية البشرية، اختيرت كنموذج اختبار مادة كيميائية. العمر-مزامنة C. ايليجانس البيض قد تعرضت إلى ثنائي ميثيل سلفوكسيد ([دمس]) أو اتوبوسيدي، وثم رصد نمو C. ايليجانس كل يوم لمدة 4 أيام من ملاحظة ستيريو المجهر. العدد الإجمالي للبيض أرسى من C. ايليجانس تعامل مع [دمس] أو كان يعول etoposide أيضا باستخدام المجهر ستيريو. العلاج Etoposide تأثرا كبيرا بالنمو والتكاثر من C. ايليجانس. بالمقارنة من العدد الإجمالي للبيض تضعه من الديدان مع فترات العلاج المختلفة للمواد الكيميائية، يمكن أن تكون قررت أن السمية الإنجابية للمواد الكيميائية على الاستنساخ C. ايليجانس عكسها أو لا رجعة فيها. قد يكون من المفيد لكل من التنمية من المخدرات المختلفة وتقييم المخاطر سميات البيئية هذه البروتوكولات.
تقييم السمية أمر ضروري لتطوير المستحضرات الصيدلانية، والمغذيات، وكوسميسيوتيكالس، فضلا عن تقييم المخاطر للسموم البيئية المختلفة. نموذج القوارض واحدة من الأكثر شعبية في فيفو التجريبية نظم هذا دراسة علم السموم؛ وبدلاً من ذلك، تستخدم على نطاق واسع أيضا الكائنات الحية غير الثدييات مثل C. ايليجانس . نماذج تقييم السمية في الثدييات عدم تعود بالفائدة بسبب القضايا الأخلاقية الحيوان أيضا راحتهم وفائدة النظر في الفعالية من حيث التكلفة والصيانة والسرعة وإمكانية تكرار نتائج1،2 ،،من34.
C. ايليجانس، تربة جولة دودة، واستغلت كحيوان نموذجية في البحوث الأساسية والتطبيقية والكيمياء وعلم الأحياء المختلفة. أنها طويلة 1 مم، ديدان أسطوانية شفافة، ويتم الاحتفاظ ببساطة في صلبة أو سائلة ديدان أسطوانية نمو وسائل الإعلام (NGM) التي تتغذى على سلالة البكتيريا الإشريكيّة القولونية OP50. C. ايليجانس لها دورة حياة قصيرة، ويضع N2 البرية من نوع C. ايليجانس حوالي 300 البيض. ولذلك، فإنه يتم نشر بسهولة لاستخدامها كمواد تجريبية3،،من45. C. ايليجانس كما تستخدم على نطاق واسع في الدراسات السمية للعديد من الأدوية والملوثات البيئية6،7،،من89.
نظراً لأن العديد من الأدوية السرطان تستهدف سرعة تقسيم الخلايا السرطانية، التي يمكن أن تلحق الضرر أيضا سرعة تقسيم الخلايا الطبيعية مثل نخاع العظام وظهاره الأمعاء وخلايا بصيلات الشعر. على سبيل المثال، topoisomerase المثبطة السرطان المخدرات تستهدف عملية النسخ المتماثل للحمض النووي لخلايا السرطان؛ ولذلك، أنها تمنع أيضا سرعة تقسيم الخلايا العادية. يحتوي كل كائن حي توبويسوميراسيس، وهذه topoisomerase مثبطات على الأرجح أثر النظم الإيكولوجية البيئية6،10،11. وهكذا، منصة تقييم سمية المخدرات حيوان نموذج باستخدام قيمة لكل من التنمية والأدوية وتقييم المخاطر البيئية.
في هذه المقالة، نحن وصف بروتوكولات مفصلة لاختبار سمية اتوبوسيدي، وعامل السرطان سريرية أن أهداف topoisomerase الثاني، كنموذج المواد كيميائية سامة في C. ايليجانس. لهذا الغرض، ونحن سوف تصف طريقة قياس حجم الجسم وإجمالي عدد البيض تضعه في C. ايليجانس تعامل مع اتوبوسيدي.
في هذه المقالة، يصف لنا تقييم سمية المواد الكيميائية في C. ايليجانس، ديدان أسطوانية تربة، باستخدام اتوبوسيدي كمثال السمية. ولهذا الغرض، استخدمنا شرطين التجريبية. في المجموعة الأولى، C. ايليجانس كانت تزرع في اتوبوسيدي الذي يتضمن لوحات من البيض إلى مرحلة البالغين الشباب، ومن ثم سم…
The authors have nothing to disclose.
أيد هذه الدراسة المنح البحثية الداخلية معهد كوريا للعلوم والتكنولوجيا (2E27513)، وفي عالية القيمة المضافة الغذائية تكنولوجيا التنمية برنامج (IPET) الممولة من وزارة الزراعة والأغذية والشؤون الريفية (315067-03).
Agar | Affymetrix, USA | 10906 | |
Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
Cholesterol | Sigma, USA | C3045 | |
Dimethyl sulfoxide | Sigma, USA | D2650 | |
Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
Etoposide | Sigma, USA | E1383 | |
Image J software (ver 1.4) | Natinoal Institute of Health, USA | https://imagej.nih.gov/ij/ | |
Microscope camera | Jenopitk, Progress Gryphax, Germany | ||
Peptone | Merck, USA | 107213 | |
35 × 10 mm Petri dish | SPL Life Sciences, South Korea | 10035 | |
90 × 15 mm Petri dish | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
Stereo microscope | Nikon, Japan | SMZ800N | |
Yeast extract | Becton Dickinson, USA | 212750 |