Aqui, descrevemos um método de amostragem de sangue de veia de cauda simples em ratos não anestesiados, usando um sistema de tubo de aspiração. Este método reduz o risco de exposição direta a sangue e simplifica a recolha de amostras múltiplas de uma única punção venosa.
Sangue pode ser coletadas de ratos em um número de locais de amostragem. Por exemplo, a veia da cauda é uma excelente localização para amostragem de sangue. No entanto, a veia da cauda é fina, para que às vezes é difícil de perfurar. Além disso, a veia da cauda tem fluxo sanguíneo baixo e requer um tempo de amostragem longo para obter sangue suficiente. O presente relato descreve um método de amostragem de sangue simples, o método de coleta de sangue do vácuo, que geralmente é usado para obter amostras de sangue de pacientes, aqui usados para ratos não anestesiados. A ponta da agulha 22g borboleta foi inserida dentre as veias de cauda lateral, aproximadamente 2-3 cm da ponta da cauda em um ângulo de aproximadamente 20° e o sangue foi coletado no tubo de vácuo coleção inserindo o va o fim de borracha da agulha borboleta cuum tubo de coleta de sangue. Os presentes resultados experimentais mostram que a taxa de sucesso foi de 95% no grupo experimental e 90% no grupo iniciante. A taxa de sucesso e punção vezes foram semelhantes entre os dois grupos. A duração da amostragem foi significativamente menor no grupo experimental comparado ao grupo de iniciante. Em conclusão, este método de coleta de sangue do vácuo para amostragem sequencial de sangue da veia cauda de ratos não anestesiados é viável e fácil de aprender, que pode servir como uma alternativa confiável para outros convencionalmente usado técnicas de recolha de amostras de sangue para ratos.
Colheita de sangue de ratos é necessária para uma grande variedade de estudos experimentais. Técnicas para coleta de sangue de rato incluem a punção do coração, plexo retrô-orbital, veia jugular, veia safena, os vasos sanguíneos de cauda, artéria carótida, aorta abdominal e veia cava. A maioria das técnicas (exceto a veia safena e punção de vaso sanguíneo de cauda) requerem anestesia1,2. Veias da cauda do rato são rotineiramente perfuradas para amostragem de sangue e injeção vascular. Após ter tratado a cauda com água morna, os vasos sanguíneos são bem dilatada e apropriado para a manipulação, mesmo quando os ratos são anestesiados3.
Apesar do desenvolvimento de técnicas novas e melhoradas para obter amostras de sangue em animais de laboratório pequeno2, não sempre é fácil obter sangue suficiente quando a amostragem de pequenos animais. A veia da cauda de ratos é uma excelente localização para amostragem de sangue4. No entanto, a veia da cauda é fina, assim às vezes é difícil de perfurar e levaria muito tempo para obter sangue suficiente devido ao seu fluxo de sangue baixa. Coleta de sangue através de um sistema de tubo de vácuo extração é um método típico na prática clínica diária. Este sistema fechado para coleta de sangue, reduz o risco de exposição direta a sangue e tornou mais fácil de tirar amostras múltiplas de uma única punção venosa5. O presente relato descreve um método de amostragem de sangue de veia de cauda simples em ratos não anestesiados, usando o sistema de tubo de aspiração. Esse método é fácil de dominar e pode ser usado para obter um grande volume de sangue repetidamente em ratos.
O presente relato descreve um método de coleta de sangue fácil de aprender em ratos. Nossos resultados mostraram que esse método é viável para repetidamente coletar um grande volume de sangue dos ratos. Além disso, esse método poderia ser facilmente dominado com uma curva de aprendizagem a curto prazo. Este procedimento pode ser realizado em ratos não anestesiados e só faz com que o mínimo de estresse para os animais.
Sangue pode ser coletadas de ratos em vários locais. A veia da cauda é uma excelente localização para amostragem de sangue4. No entanto, não sempre é fácil de obter suficiente volume de sangue da veia sangue fino e baixo fluxo cauda dos ratos. O sistema de coleta de sangue do vácuo é geralmente usado para coletar amostras de sangue dos pacientes na prática clínica diária. Este sistema de coleta de sangue do vácuo tem sido usado em pacientes e animais de pesquisa por um longo tempo8,9,10. Este sistema consiste de um tubo de coleta de sangue do vácuo com agulha de parede e borboleta silicone revestido tubo interno. Ele baseou-se no princípio da pressão negativa do vácuo e permite o desenho contínuo de sangue sem o risco de coleta de sangue, o que também reduz a chance de contaminação e a hemólise11. O volume da amostra de sangue no cateter é cerca de 0,3 mL. Depois de retirar a agulha da veia da cauda, o sangue bloqueado o cateter vai fluir no tubo de vácuo de coleta devido o vácuo. Este método também é aplicável para a coleta de sangue de ratos com menos de 100 g com o uso de uma agulha de punção menor.
Este método de coleta de sangue tem várias vantagens. Este procedimento só causa lesão mínima para ratos e coleta de sangue pode ser realizada sem o uso de anestésicos, assim a influência da resposta ao estresse e anestésicos sobre a amostra de sangue pode ser evitada. Nossas observações mostraram que ratos estavam quietos no suporte de plástico restrição durante o procedimento e havia sem mortes durante estas experiências. Em segundo lugar, repetido a coleta de sangue, cada um ou dois dias é possível, que permite a amostragem frequente de sangue com um volume adequado para vários fins de pesquisa. Finalmente, esse método é fácil de aprender e foi facilmente dominado por iniciantes após um período de aprendizagem de curta (2H), conforme indicado pelas taxas de sucesso semelhantes e punção vezes entre os grupos experimentais e iniciante neste relatório. Em um relatório anterior, Lee et al demonstraram um método similar de amostragem de sangue da veia lateral da cauda do rato4. Nosso método é mais simples do que o relatado por Lee et al . 4 em que nós diretamente inserir a agulha de punção da veia da cauda e a outra extremidade do tubo está diretamente ligado ao tubo de vácuo para coleta de sangue, sem o uso de uma seringa extra e aspiração manual do sangue e sem a necessidade de ‘ leite ing’ a veia para facilitar o fluxo de sangue. Coleta de sangue com esse sistema fechado reduz a possibilidade de contaminação do sangue. Uso do plástico titular restrição também reduz o estresse para o rato e facilita a fixação da cauda.
As duas etapas seguintes são críticas para o sucesso da aplicação desse método. 1) estender a cauda e evitar o movimento da cauda; 2) suavemente punção da veia em um ângulo de 20 ° para evitar a punção na veia e manter a agulha de punção na veia.
Em conclusão, o método de coleta de sangue do vácuo adotado em ratos é segura, viável e fácil de prática. Esse método permite a amostragem frequente de sangue com um volume adequado de sangue obtido de ratos não anestesiados.
The authors have nothing to disclose.
Os autores têm não há agradecimentos a fazer.
a double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 22G | (0.7×25mm) |
vacuum tubes | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 2 ml | |
rat restraining holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 250g rat hoder model | |
normal salt diet for rats | Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study | ||
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. |