Hier beschrijven we een eenvoudige staart veneuze bloedmonsters methode bij niet-verdoofd ratten met behulp van een systeem van de buisjes opzuigen. Deze methode vermindert het risico van directe blootstelling aan bloed en vereenvoudigt meerdere bemonstering van een enkele Venapunctie.
Bloed kunnen worden verzameld van ratten in een aantal locaties van de bemonstering. Bijvoorbeeld, is de staart-ader een superieure locatie voor bloedmonsters. Echter is de ader van de staart dun zodat het is soms moeilijk te doorprikken. Bovendien, de staart-ader heeft lage bloedtoevoer en vereist een lange bemonsteringstijdstip om voldoende bloed. Dit verslag beschrijft een eenvoudig bloed bemonsteringsmethode, de vacuüm bloed collectie methode, die meestal gebruikt wordt om het verkrijgen van bloedmonsters van patiënten, hier gebruikt voor niet-verdoofd ratten. De 22 G vlinder naald tip is ingevoegd in een van de aders van de laterale staart ongeveer 2-3 cm vanaf het puntje van de staart onder een hoek van ongeveer 20°, en bloed in de buis vacuüm collectie werd verzameld door het invoegen van het einde van de rubber van de vlinder naald in de va cuum bloed collectie buis. De huidige experimentele resultaten blijkt dat het slagingspercentage 95% in de experimentele groep en 90% in de groep van de beginner. Het slagingspercentage en punctie tijden waren vergelijkbaar tussen twee groepen. De bemonstering duur was aanzienlijk korter in de experimentele groep ten opzichte van beginner groep. Kortom, is deze methode vacuüm bloed collectie voor sequentiële bloedmonsters van de ader van de staart van niet – narcose ratten haalbaar en easy-to-learn, die kan dienen als een betrouwbare alternatief voor andere conventioneel bloed sampling technieken voor gebruikt ratten.
Bloedmonsters van ratten is vereist voor een breed scala aan experimentele studies. Technieken voor de bloedinzameling van de rat omvatten aanprikken van het hart, retro-orbitaal plexus halsslagader, saphenous ader, staart bloedvaten, halsslagader, abdominale aorta en vena cava. De meeste technieken (behalve saphenous ader en staart bloedvat punctie) vereisen verdoving1,2. Aderen van de staart van de rat zijn routinematig doorboord voor bloedmonsters en vasculaire injectie. Na behandeling van de staart met warm water, zijn de bloedvaten goed verwijde en geschikt voor manipulatie, zelfs wanneer er ratten zijn narcose3.
Ondanks de ontwikkeling van nieuwe en verbeterde technieken voor het verkrijgen van bloedmonsters in kleine laboratorium dieren2, is het niet altijd gemakkelijk te verkrijgen van voldoende bloed bij de bemonstering van kleine dieren. De ader van de staart van ratten is een superieure locatie voor bloed bemonstering4. Echter, de ader van de staart is dun, dus het is soms moeilijk te doorprikken en lang zou duren om genoeg bloed als gevolg van zijn lage bloedtoevoer. Bloedinzameling via een opzuigen buis systeem is een typische methode in de dagelijkse klinische praktijk. Dit gesloten systeem voor het verzamelen van bloed vermindert het risico van directe blootstelling aan bloed en gemakkelijker meerdere monsters van een enkele Venapunctie5te nemen. Het onderhavige verslag wordt een eenvoudige staart veneuze bloedmonsters methode bij niet-verdoofd ratten met behulp van het opzuigen buis systeem beschreven. Deze methode is gemakkelijk te beheersen en kan worden gebruikt voor het verkrijgen van een grote hoeveelheid bloed herhaaldelijk bij ratten.
Dit verslag beschrijft een methode collectie easy-to-learn bloed bij ratten. Onze resultaten toonden aan dat deze methode haalbaar is voor herhaaldelijk het verzamelen van een grote hoeveelheid bloed van ratten. Bovendien, deze methode gemakkelijk kan worden beheerst met een korte leercurve. Deze procedure kan worden uitgevoerd bij ratten niet-verdoofd en veroorzaakt alleen minimale stress voor de dieren.
Bloed kunnen worden verzameld van ratten op verschillende locaties. De ader van de staart is een superieure locatie voor bloed bemonstering4. Het is echter niet altijd eenvoudig te verkrijgen genoeg bloed volume van de dunne en lage bloed stroom staart ader van de ratten. Het systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed wordt meestal gebruikt voor het verzamelen van bloedmonsters van patiënten in de dagelijkse klinische praktijk. Dit systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed is bij patiënten en onderzoek dieren gebruikt voor een lange tijd8,9,10. Dit systeem bestaat uit een vacuüm bloed collectie buis met siliconen gecoate binnenband muur en vlinder naald. Het was gebaseerd op het beginsel van de vacuüm onderdruk en laat de continue tekening van bloed zonder het risico van het verzamelen van bloed, dat ook de kans op besmetting en hemolyse11 vermindert. De hoeveelheid bloedmonster in de katheter is ongeveer 0.3 mL. Na de terugtrekking van de naald uit de staart ader, zullen het bloed geblokkeerd in de katheter vloeien in de verzamelen vacuüm buis als gevolg van het vacuüm. Deze methode is ook van toepassing voor het verzamelen van bloed van ratten met een gewicht van minder dan 100 g met het gebruik van een kleinere naald punctie.
Dit bloed collectie methode heeft verschillende voordelen. Deze procedure slechts minimale schade toebrengt aan ratten en bloedinzameling kan worden uitgevoerd zonder het gebruik van verdoving, dus de invloed van de stress-respons en de verdoving op het bloedmonster kan worden vermeden. Onze observaties bleek dat ratten stil in de plastic houder van de matigende tijdens de procedure en er geen doden tijdens deze experimenten waren. Ten tweede, herhaalde bloedinzameling elke één of twee dagen is mogelijk, waardoor frequente bemonstering van bloed met een voldoende volume voor verschillende onderzoeksdoeleinden. Ten slotte, deze methode is eenvoudig te leren en was gemakkelijk onder de knie door beginners na een periode van korte (2 h) leren, zoals aangegeven door de soortgelijke slagingspercentages en de punctie tijden tussen de groepen van het experimentele en beginners in dit verslag. In een vorig rapport, Lee et al. aangetoond een gelijkaardige methode voor de bemonstering van bloed uit de ader van de laterale staart van de rat-4. Onze methode is eenvoudiger dan die gerapporteerd door Lee et al. 4 in dat we direct de naald punctie in de ader van de staart en het andere uiteinde van de buis invoegen is direct verbonden met de vacuüm buis voor het verzamelen van het bloed, zonder het gebruik van een extra spuit en handmatige aspiratie van het bloed en zonder de noodzaak van ‘ melk ING’ de ader ter vergemakkelijking van de bloedstroom. Het verzamelen van bloed met dit gesloten systeem vermindert de kans op besmetting van bloed. Gebruik van de plastic beteugeling houder ook vermindert de stress aan de rat en bevordert de fixatie van de staart.
De volgende twee stappen zijn cruciaal voor de succesvolle toepassing van deze methode. 1) het uitbreiden van de staart en te voorkomen dat het verkeer van de staart; 2) voorzichtig doorprikken de ader onder een hoek van 20 ° te voorkomen van lekke band via de ader en houd de naald punctie in de ader.
Kortom, is de aangenomen vacuüm bloed collectie methode bij ratten veilig, haalbaar en makkelijk om te oefenen. Deze methode kan regelmatige bemonstering van bloed met een volume van voldoende bloed verkregen uit niet-verdoofd ratten.
The authors have nothing to disclose.
De auteurs hebben geen bevestigingen te maken.
a double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 22G | (0.7×25mm) |
vacuum tubes | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 2 ml | |
rat restraining holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 250g rat hoder model | |
normal salt diet for rats | Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study | ||
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. |