이 원고는 자유 비행 꿀벌에 대한 간단한 비 침습적 방법뿐만 아니라 억제 꿀벌의 정확한 지역화 된 처리 수 있도록 더 많은 침략 변종을 포함, 꿀벌에 약리 에이전트를 관리하기위한 여러 프로토콜을 설명합니다.
꿀벌은 놀라운 학습 능력 및 고급 사회적 행동과 의사 소통을 보여줍니다. 또한, 뇌는 작은 시각화하고 연구하기 쉽다. 따라서, 꿀벌은 오랫동안 사회와 자연 행동의 신경 기초를 공부 신경 생물 학자와 neuroethologists 사이에 선호하는 모델이었다. 이는 동작을 방해하지 꿀벌을 연구하기위한 실험 방법이 검토되고 있다는 것이 중요하다. 이 때문에 꿀벌의 약리학 적 조작을위한 기술의 범위를 개발할 필요가 있었다. 이 논문에서 우리는 약리 에이전트의 광범위한 절제 또는 자유 비행 꿀벌을 치료하는 방법을 보여줍니다. 이 중 하나를 전신 또는 국소 방식으로 정확한 약물 전달을 허용 모두 경구 및 국소 치료와 같은 비 침습적 방법뿐만 아니라 더 침습적 인 방법을 포함한다. 마지막으로, 우리는 각 방법의 장점과 단점을 토론하고 설명일반적인 장애물과 최선의 방법을 극복하는 방법. 우리는 생물학적 질문이 아닌 다른 방법으로 주위에 실험 방법을 적응의 중요성에 대한 논의와 결론 지었다.
카를 폰 프리 슈는 자신의 춤 언어 (1)를 밝혀 때문에, 꿀벌은 동물의 행동 및 신경 생물학 연구자를위한 인기있는 연구 종을 남아있다. 최근 새로운 분야의 수많은 이러한 두 필드 및 그들과 함께 제기 한 여러 가지 다른 분야 (예를 들면, 분자 생물학, 유전학, 컴퓨터 과학)의 교차점에 나왔다. 이것은 문제가 신경계 내에서 활동의 결과 방법을 이해하기위한 새로운 이론과 모델의 신속한 개발을 주도하고있다. 때문에 독특한 라이프 스타일, 풍부한 행동 레퍼토리, 실험 및 약리 조작의 용이성, 꿀벌이 혁명의 최전선에 남아있다.
꿀벌은 같은 그 기본 학습과 기억 2, 3, 결정 (4)을, 후각 5, 시각 처리 (6)과 같은 기본적인 신경 생물학적 문제를 연구하는 데 사용하고있다. 최근 몇 년 동안, 혼11, 잠 12 13 노화, 또는 메커니즘 마취 (14)의 기초 – EY 꿀벌도 같은 중독성 약물 (7)의 영향으로 일반적으로 의학 연구를 위해 예약 주제를 연구하기위한 모델로 사용되어왔다.
고전적인 유전자 모델 생물에 대한 달리 (예를 들어, D. melanogaster의, 선충, M.의의 musculus)이 현재 15을 변경하더라도 꿀벌의 신경 기능을 조작 할 수 거의 유전 적 도구가 있습니다. 대신, 꿀벌 연구는 주로 약리 조작에 의존하고있다. 이것은 매우 성공적이었다; 그러나, 꿀벌의 연구는 다양한 약물 투여 방법의 범위가 필요되도록한다. 꿀 꿀벌 연구는 다른 분야와 배경을 가진 연구자들에 의해 연구되고, 매우 다양한 문제를 해결하고, 실험 방법의 다양한 사용합니다. 많은 rese아치 질문에 자유롭게 그들의 식민지, 또는 두 가지 모두에 상호 작용이 될 자유 비행에 꿀벌을 필요로한다. 이것은 어려운 개별 실험 동물을 추적 할 수 있도록하고, 억제 또는 삽관 실현성하게 할 수있다.
꿀벌 연구의 다양성을 수용하기 위해, 약물 전달 방법의 다양한 약물 동력 학적 및 약력 학적 프로필에있어서의 침입, 및 신뢰성 문제의 패러다임에 맞는 것을 보장하면서 강력하고 유연한 관리를 허용 필요하다. 때문에 이러한 다양한 요구, 대부분의 연구 그룹은 그들 만의 독특한 약물 투여 방법을 개발했습니다. 지금까지이 꿀벌 연구 커뮤니티의 힘이었다; 이는 다른 환경에서 동일한 약제의 투여 방법을 가능 어레이의 개발을 유도 하였다. 여기에 우리의 목표는 꿀벌의 약리 조작에 대해 하나의 표준화 된 방법을 개발하는 것이 아니라 방법을 강조하지 않습니다 그특히 성공적인 것으로 입증, 도움 연구자들은이를 채택했다. 우리는 기본 작동 방식의 원칙뿐만 아니라, 자신의 장점과 단점에 대해 설명합니다.
위에서 설명한 방법은 자유 비행 또는 무력화 꿀벌 중 하나의 간단하고 효과적이고 강력한 치료를 할 수 있습니다. 이러한 방법은 많은 실험 패러다임 생물 질문 (표 1)와 호환됩니다. 자유 비행하는 모든 방법을 쉽게 밝혀 꿀벌에 적용될 수있다. 임시 구속 침습성 치료 방법은 종종 꿀벌 '비행하는 능력을 손상시킬 수 있기 때문에 역방향 그러나 덜 성공적이다.
<p class="jove_content…The authors have nothing to disclose.
This project was funded by ARC grant DP0986021 and NHMRC grant 585442. ABB is supported by an ARC Future Fellowship (FT140100452). JAP is supported by an iMQRES scholarship awarded by Macquarie University and by a DAAD-Doktorandenstipendium awarded by the German Academic Exchange Service. JMD is supported by CNRS and University Paul Sabatier.
Sucrose | Sigma-Aldrich | S8501 | Any supplier will do |
Sodium Chloride | Sigma-Aldrich | S7653 | |
Potassium Chloride | Sigma-Aldrich | P9333 | |
Magnesium Chloride hexahydrate | Sigma-Aldrich | M2670 | |
Calcium Chloride dihydrate | Sigma-Aldrich | C8106 | |
Dextrose monohydrate | Sigma-Aldrich | 49159 | |
Phosphate Buffer Saline (PBS) | Sigma-Aldrich | P4417 | |
Protection Wax | Dentaurum | 124-305-00 | |
HEPES | Sigma-Aldrich | H3375 | |
dimethylformamide | Sigma-Aldrich | D4551 | |
95% Ethanol | Sigma-Aldrich | 493511 | |
Glass capillary | WPI | 1B100F-3 | |
23 G NanoFil needle | WPI | NF33BV-2 | |
Very fine forsceps | Dumont | 0208-55-PO | |
Electrode puller | SRI | 2001 | |
FemtoJet Microinjector | Eppendorf | 5247 000.01 | |
Eicosane | Sigma-Aldrich | 219274 | |
manual micromanipulator | Brinkmann Instrumentenbau | MM-33 | |
electronic micromanipulator | Luigs & Neumann Feinmechanik + Elektortechnik | Junior unit XYZ | |
stereomicroscope | Leica | M80 | |
soldering iron | Weller | WESD51 | |
Dextran, Alexa Fluor 546, 10000 MW | ThermoFisher Scientific | D-22911 | |
Dextran, Alexa Fluor 568, 10000 MW | ThermoFisher Scientific | D-22912 | |
small Petri dish | Sigma-Aldrich | P5481 | |
mineral oil | Sigma-Aldrich | M5904 | |
50 mL Centrifuge tube | ThermoFisher Scientific | 339652 | |
forceps | Australian Entomological Supplies | ||
Blade holder and breaker | Australian Entomological Supplies | E130 | |
Feather double edged razor blade | ThermoFisher Scientific | 50-949-135 | |
Nichrome wire | Any supplier will do | ||
Electrical wires | Any supplier will do | ||
Model paint | Tamiya USA | Depends on colour | |
Repeating dispenser | Hamilton company | PB-600-1 | |
Glass syringe | WPI | NANOFIL | |
flourescence viewing system | Nightsea | SFR-GR | |
graticule | ProSciTech | S8014-24 | |
microcapillary with holder | Drummond | 1-000-0010 | |
Liquid silicone | Any supplier will do | ||
Thermocouple | Digitech | QM-1324 | |
Micropipette | Eppendorf |