Para esclarecer o processo de várias etapas de difusão peritoneal de carcinoma dos ovários, o presente estudo apresenta um modelo experimental murino de desenvolvimento do tumor original e metástases através de inoculação peritoneal ortotópico com essas células tumorais.
carcinoma epitelial do ovário (EOC) está associada a um prognóstico ruim porque mostra disseminação peritoneal. Para melhorar o prognóstico, é importante controlar a disseminação peritoneal. No entanto, ainda não está claro como as células tumorais separar de lesões primárias e anexar ao mesotélio. O estabelecimento de um modelo animal apropriado é necessário para obter uma compreensão do mecanismo de disseminação peritoneal in vivo. No estudo actual, introduz-se o processo a partir da injecção local de células EOC para dentro da superfície do ovário murino para o desenvolvimento de metástases, incluindo o peritoneu e os órgãos distantes. Foram utilizados ratinhos nus fêmea (BALB / c nu / nu) com 8 semanas de idade. Sob um campo de vista microscópico, células EOC (1 x 10 5 células / ml de matriz de médio extracelular (ECM) à base de hidrogel / ovário unilateral / mouse) foram injetados em ovários murino através de uma abordagem retroperitoneal pelo flanco dorsal. Este método proposto é um less procedimento invasivo para o mouse e minimiza os danos ao ovário. Aqui, descrevemos os passos metodológicos para o desenvolvimento da formação do tumor original e metastático do EOC.
Carcinoma epitelial do ovário (EOC) representa a maior taxa de mortalidade relacionada ao câncer entre as doenças malignas ginecológicas 1. EOC está associada a um mau prognóstico, principalmente devido ao seu final sintomatologia, e é muitas vezes associado a várias disseminações intraperitoneal e metástases à distância 2-4. disseminação peritoneal é um processo multi-passo. Em primeiro lugar, as células de tumor a partir de separar as lesões primárias, e migrar para dentro da cavidade abdominal. Quando as células tumorais anexar ao mesotélio peritoneal, eles começam a invadir os tecidos através do mesotélio 5,6. A fim de melhor compreender a biologia do tumor (por exemplo, a progressão do câncer e resposta terapêutica), modelos de ratos fornecer uma riqueza de informações. Um xenoenxerto de cancro humano com células é amplamente utilizada para modelos de ratos em que as células de cancro humano são inoculados por via subcutânea, por via intraperitoneal, por via intravenosa, e ortotopicamente. Um modelo animal com um ortotopicamente grafted tumor pode gerar mais eficientemente e com precisão os resultados que reflectem o ambiente tumoral em seres humanos, em comparação com um modelo animal com um tumor heterotopicamente enxertado. Por isso, para muitos tumores humanos, os modelos de transplante ortotópico foram estabelecidas 7-11.
Aqui, descrevemos a inoculação ortotópico de células EOC humanos através de uma abordagem retroperitoneal pelo flanco dorsal, que tem capacidade de invasão limitada em comparação com a inoculação ventral. Esta técnica pode proporcionar uma variedade de informações úteis sobre EOC, particularmente o mecanismo de difusão intraperitoneal.
Os modelos animais são essenciais para analisar os mecanismos de desenvolvimento de tumores, progressão, metástase, e a eficácia do fármaco contra as células cancerosas. Os ratinhos portadores de células cancerosas do ovário humano, também têm sido usados como um modelo animal. Aqui, descrevemos um procedimento menos invasivo para a administração de células tumorais de ovário em um sítio ortotópico. Usando este procedimento, a inoculação para o ovário através de uma abordagem retroperitoneal pe…
The authors have nothing to disclose.
Os autores agradecem os membros do Departamento de Obstetrícia e Ginecologia e Biologia do Câncer para suas discussões úteis e assistência técnica. Este estudo foi apoiado por uma Sociedade Japonesa para a Promoção da Ciência (JSPS) Grant-in-Aid para a Investigação Científica (15K15604; a H. Kajiyama).
Matrigel matrix | BD | 354234 | ECM-based hydrogel |
Insulin syringe | TERUMO | SS-05M2913 | 1/2cc, 29Gx1/2" |
Suturing needle with suture | 11mm, 3/8, Nylon6-0 | ||
Reflex 7mm Wound Clip Applier | CellPoint Scientific | 204-1000 | |
Reflex 7mm wound clips | CellPoint Scientific | 203-1000 |