Preclinical models of intracerebral hemorrhage are utilized to mimic certain aspects of clinical disease. Thus, mechanisms of injury and potential therapeutic strategies may be explored. In this protocol, two models of intracerebral hemorrhage are described, intrastriatal (basal ganglia) injections of autologous blood or collagenase.
Intraserebral kanama (İSK) serebrovasküler hastalık yaygın bir şeklidir ve önemli morbidite ve mortalite ile ilişkilidir. Hemostaz ve pıhtı çıkarılması hedefleniyor büyük klinik çalışmaların etkili tedavi ve başarısızlık eksikliği ICH daha mekanizması odaklı soruşturma için ihtiyaç göstermektedir. Bu araştırma, klinik öncesi modellerde tarafından sağlanan çerçeve aracılığıyla gerçekleştirilebilir. Popüler kullanımı iki kemirgen modelleri, otolog kan veya klostridial kolajenaz ya intrastriatal (bazal ganglia) enjeksiyon yer alır. Yana, her model İSH'lı ilgili belirgin farklı patofizyolojik özellikleri temsil eder, belli bir modelin kullanımı öğretilmektedir hastalığın hangi yönü dayalı seçilebilir. Örneğin, otolog kan enjeksiyonu en doğru intraparenkimal kan varlığı için beynin yanıtı temsil eder, ve en yakın lobar kanama çoğaltabilir. Clostridial kollajenaz enjeksiyon en doğru s temsilalışveriş merkezi damar rüptürü ve derin kanamalar hematom evrimi karakteristik. Böylece farklı hematom oluşumu, nöroenflamatuar tepki, serebral ödem gelişmesi ve nörodavranışsal sonuçları her model sonuçları. Sözde bir terapötik müdahale Sağlamlık en iyi iki model kullanılarak değerlendirilebilir. Bu protokol, her iki model, yaralanma hemen ameliyat sonrası gösteri ve erken post-operatif bakım teknikleri kullanılarak Vaginal indüksiyon gösterilmiştir. Her iki model de tekrarlanabilir yaralanmaları, hematom hacimleri ve nörodavranışsal kayıpla sonuçlanabilir. Çünkü insan ICH heterojenite, birden fazla preklinik modeller iyice patofizyolojik mekanizmalarını keşfetmek ve potansiyel tedavi stratejileri test etmek için gereklidir.
Intraserebral kanama (İSK) etkilenen hastaların yaklaşık% 40-50 30 gün içinde ölme 1 ile serebrovasküler hastalık nispeten sık görülen şeklidir. Ne yazık ki, küçük bir iyileşme son 20 yıl boyunca 2 ölüm oranında yapılmıştır. Ulusal Sağlık Enstitüleri 3 ve Amerikan Kalp Derneği 4 kılavuzların raporları patofizyolojisi anlayış genişletmek ve yeni tedavi yaklaşımları için hedeflerini geliştirmeye ICH klinik olarak ilgili modellerinin geliştirilmesinin önemini vurguladı.
Çeşitli modeller, insan ICH 5 taklit var. ICH patofizyoloji yetişkinlerin anlama olarak, çeşitli modeller hastalığın farklı yönlerini incelemek için kullanılabilir, belirgin hale gelmiştir. Daha önce kullanılan modeller kemirgen amiloid anjiopati 6, intraparenkimal mikrobalon ekleme ve enflasyon 7 ve doğrudan arteriyel kan bulunmaktadırinfiltrasyon 8,9. Amiloid anjiyopati ikinci Lobar kanama transgenik farelerin kullanılması ile model ve ayrı bir alt tipi ICH temsil edilmiştir. Mikrobalonların modelleri hematom akut kütle etkisinin taklit eden ancak, kan varlığı için beynin hücresel yanıtı yakalamak için başarısız. Son olarak, doğrudan arteriyel kan sızması femoral arterden arteriyel baskılara beyin tabi. Dolayısıyla, bu model taklit arter basınçları ve kan varlığı ancak küçük kan damarı yırtılması gelen mikrovasküler yaralanma beyin tabi değildir. Bundan başka, bu model, doğal olarak yüksek bir değişkenlik vardır. Onlar yaş olarak İlginçtir, spontan hipertansif sıçanlar 10 spontan ICH gelişir. ICH geliştirme sonra bu hayvanların çalışma İSH'lı için insanları yatkınlık önemli Komorbiditelerin birinin varlığında hastalığı taklit edebilir. Klostridial kolajenaz 11 veya a instrastiatal enjeksiyonu bu model mevcut olmakla birlikte, enjeksiyon intrastriatalutologous tüm kan 12, şu anda en yaygın iki model ICH klinik öncesi araştırmalarda kullanılır.
ICH modeli seçimi türlerin seçimi ve hematom oluşumunu sağlama yöntemi de dahil olmak deneysel sorusunun objektif dayalı yapılmalıdır. Örneğin, domuz farelere göre daha büyük bir beyaz madde beyin hacmi ile büyük hayvanlar olmalarıdır. Böylece, domuz modeller İSH'lı aşağıdaki beyaz cevher patofizyolojisini incelemek için uygundur. Aksine, kemirgen beyin büyük ölçüde gri madde vardır, ancak transgenik sistemleri İSH'lı yaralanma ve iyileşme moleküler mekanizmalarını değerlendirmek için kemirgenler yararlı olun. Her model dikkatli bir deney öncesinde dikkat edilmesi gereken, kendine özgü güçlü ve zayıf yönlerini (Tablo 1) vardır.
Aşağıdaki protokoller farelerde otolog kan ve kolajenaz enjeksiyon modellerini göstermektedir. Bu modeller her biri aslında sıçanlarda geliştirilen modellerden çevrilmiştir13,14 ve İSH'lı hücre ölümü ile ilişkili moleküler mekanizmalarını keşfetmek için yaygın olarak kullanılabilir transgenik teknolojinin kullanımına izin. Hem insan İSH'lı belirgin farklı bir yaralanma mekanizmalarını ifade eder, hem de davranışsal ve histolojik önlemler açısından belirgin farklı beklenen sonuç var. Böylece, bazı hipotezler diğer üzerinden bir modele kendilerini borç olabilir, ancak birçok fikirler hem de model doğrulama gerekebilir.
Kollajenaz-ve otolog kan enjeksiyonu intraserebral kanama modellerinin özellikleri Tablo 1.. Karşılaştırılması.
Kolajenaz Enjeksiyon | Kan Enjeksiyon | |
Kullanım kolaylığı | + + + | + + | Tekrarlanabilirlik | + + | + + |
Kanama Boyutu Kontrolü | + + | + + + |
Kan Reflü | + | + + |
İnsan Hastalığı simüle | + | – |
Basitlik | + + | + + |
Çoklu Türler kullanın | + + | + + |
Therapeutics 15-18 umut verici için klinik öncesi araştırma ve sonuçta büyük klinik çalışmalar gelişmekte olmasına rağmen, orada ICH içinde sonuçlarını iyileştirdiği gösterilmiş hiçbir farmakolojik müdahaleler ve bakım büyük ölçüde destekleyici kalır. Muhtemel tedavilerin listeleri gibi Transkriptomik ve proteomik çalışma gibi yüksek kapasiteli teknolojileri ile üretilebilir. Bu teknolojiler, ileri potansiyel terapötik hedeflerin bilgimizi ilerlemeye devam ediyor ve umut ve…
The authors have nothing to disclose.
This work was supported by the American Heart Association Scientist Development Grant and the Foundation for Anesthesia Education and Research (MLJ). We would like to thank Talaignair N. Venkatraman PhD for his assistance with magnetic resonance imaging.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Stereotactic frame | Stoelting Co. | 51603 | |
Probe holder with corner clamp | Stoelting Co. | 51631 | |
Mini grinder | Power Glide | Model 60100002 | |
0.5 µl Hamilton syringe | Hamilton Co. | 86259 | 25 gauge needle |
50 µl Hamilton syringe | Hamilton Co | 7637-01 | |
26G Hamilton needle | Hamilton Co | 7804-03 | |
Syringe pump | KD Scientific | Model 100 | |
Heat therapy water pump | Gaymar Industries, Inc. | Model# TP650 | |
Circulating waterbed | CMS Tool & Die, Inc. | ||
Rodent ventilator | Harvard Apparatus | Model 683 | |
Isoflurane vaporizer | Drager | Vapor 19.1 | |
Air flowmeter | Cole Parmer | Model PMR1-010295 | |
Induction chamber | Self made | ||
Otoscope | Welch Allyn | 22820 | |
intravenous catheter | Becton-Dickinson | 381534 | 20-gauge, 1.16 inch Insyte-W |
Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | NDC10019-360-69 | |
Collagenase Type IV-S | Sigma | C1889 | |
Polyethylene tubing PE20 | Becton-Dickinson | 427406 | |
Polyethylene tubing PE10 | Becton-Dickinson | 427401 | |
30G 1 inch needle | Becton-Dickinson | 305128 | |
27G 1 1/4 inch needle | Becton-Dickinson | 305136 | |
Surgical scissors | Miltex | 21-539 | |
Forceps | Miltex | 17-307 | |
Needle holder | Boboz | RS-7840 | |
Monofilament suture | Ethicon | 8698 | Size 5-0 |
Indicating controller | YSI | 73ATD |