Echografie heeft bewezen effectief te diagnosticeren verschillende ademhalingsziekten bij menselijke en dierlijke patiënten zijn. We tonen een uitgebreide echo protocol gebruikt door Dr Zuo het lab tot middenrif kinetiek analyseren specifiek in muismodellen. Dit is een niet-invasieve onderzoekstechniek kwantitatieve gegevens over muis respiratoire spierfunctie kan bieden.
Functie analyse van knaagdieren respiratoire skeletspieren, vooral het middenrif, wordt vaak uitgevoerd door het isoleren spierstrips middels invasieve chirurgische procedures. Hoewel dit een effectieve methode voor de beoordeling in vitro activiteit membraan, het gaat niet overleven chirurgie. De toepassing van niet-invasieve ultrasone beeldvorming als een in vivo methode is gunstig omdat het vermindert niet alleen het aantal dieren gedood, maar is ook geschikt voor het toezicht ziekteprogressie in levende muizen. Derhalve kunnen onze echografie methode waarschijnlijk helpen bij de ontwikkeling van nieuwe therapieën die spierverwonding geïnduceerd door verschillende ademhalingsziekten verlichten. Vooral in klinische diagnose van obstructieve longziekten, echografie heeft het potentieel om te worden gebruikt in combinatie met andere standaard tests om de vroege fase van diafragma spiervermoeidheid detecteren. In het huidige protocol beschrijven we hoe je middenrif contracti nauwkeurig evaluerenteit in een muismodel met behulp van een echografie techniek.
Onlangs hebben echografie technieken toegepast op muismodellen van renovasculaire hypertensie en alvleesklierkanker 1,2. Echter, deze technieken niet op grote schaal gebruikt in knaagdieren respiratoire spierfunctie assay. Daarom hebben we een echografie methode ontwikkeld als waardevol instrument voor in vivo evaluatie van longitudinale diafragma mobiliteit in muizen.
Er zijn verschillende voordelen aan echografie. Zo is invasief, veilig, draagbaar en maakt real time metingen tegen relatief lage kosten 3. Bijzonder bepaalde laagfrequente ultrasone inrichtingen konden lucht trapping, een klinisch kenmerk van chronische obstructieve longziekte (COPD) met milde tot ernstige luchtwegobstructie 4 sporen. Zo kan echografie als een gemakkelijk toegankelijke en reproduceerbare screening methode voor real-time monitoring dienen van respiratoire aandoeningen.
Echografie technieken worden vaak toegepast op grotere dieren of menselijke proefpersonen. Echter een beperkt aantal echografie studies muismodellen, die waarschijnlijk te wijten aan de uitdaging van het uitvoeren van ultrageluid op kleine schaal onderwerpen zijn. Het huidige protocol beschrijft een nieuwe werkwijze voor het meten diafragmafunctie in de muis. Bovendien, hoewel er meerdere knaagdieren studies over diafragmafunctie geweest, de meeste resultaten werden gegenereerd door het isoleren spierstrips rechtstreeks van de dieren geëuthanaseerd 5-7. Daarentegen toepassing van een in vivo diagnostische ultrasonografie werkwijze voor het analyseren membraan activiteit zou verminderen het aantal dieren opgeofferd voor experimenten. Bovendien, langdurige behandelingen gericht op het verbeteren membraan contractiliteit kan nauwkeurig worden via echografie in knaagdier modellen beoordeeld zonder offeren van dieren.
ntent "> In ons laboratorium hebben we een effectieve methode ontwikkeld voor het visualiseren en analyseren muis diafragma activiteit met een ultrasone machine, die het begrip van diafragmafunctie in vivo helpt vermijdt invasieve dieren en helpt bij de ontwikkeling van therapeutische behandelingen voor respiratoire dysfunctie.De huidige experimentele protocol ontwikkelt echografie techniek voor het membraan activiteit in een muismodel via een niet-invasieve, in vivo benadering. De verdoving instellingen apparaat zijn benaderd waarden, die enigszins kan worden aangepast voor elk dier sinds individuele muizen verschillend kunnen reageren op de anesthesie. Om oneigenlijk anesthesietoediening voorkomen, is het belangrijk de muis vitale functies zoals de hartslag, ademhaling en lichaamstemperatuur regelmatig controleren. Bovendien moet h…
The authors have nothing to disclose.
Dit werk wordt ondersteund door subsidies van de OU Algemeen Fonds G110 en Research Excellence Fund van biomedisch onderzoek en OSU-HRS Fonds 013.000. De auteurs willen graag Lauren Chen bedanken voor haar hulp bij de voorbereiding van dit manuscript.
Veterinary digital ultrasonic diagnostic imaging system | Edan | DUS 3 VET | Ultrasound parameters include: frequency of 6.5 MHz, Depth of 29 mm. Note: An equivalent ultrasound machine may be used for this protocol |
Micro-convex array transducer | Edan | C611 | Or equivalent |
GE Logiq i hand-carried unit (HCU) | GE Healthcare | GE Logiq i hand-carried unit (HCU) | Or equivalent |
GE 12 MHz linear array probe | GE Healthcare | 12L-RS | Or equivalent |
Veterinary anesthetic vaporizer | Webster Veterinary | Serial #: W422021 | Isoflurane was exclusively used with this vaporizer (or equivalent). A custom made induction chamber for anesthesia was assembled for initial anesthesia. Maintenance anesthesia was performed using a nose cone |
Isothesia (Isoflurane, USP) | Butler Schein | 29405 250ML PVL | Or equivalent |
Enviro-pure anesthesia absorbing canister | Surgivet Smiths Medical PM, Inc. | Part #: 32373B10 | Or equivalent |
Ultrasound transmission gel | HM Sonic | N/A | Or equivalent |
Puralube vet ointment | Puralube | NDC 17033-211-38 | Or equivalent |
Deltaphase isothermal pad | Braintree Scientific Inc. | 39DP | Or equivalent |
Hair remover | Nair | N/A | Or equivalent |
Electric razor | Remington | HC-5015 | Or equivalent |
Surgical tape | 3M Micropore | 1530-1 | Or equivalent |
Gauze sponges | Dynarex | 3262 | Or equivalent |