Summary

التشخيص بالموجات فوق الصوتية التصوير من ماوس الحجاب الحاجز وظيفة

Published: April 21, 2014
doi:

Summary

وقد ثبت التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية أن تكون فعالة في تشخيص مختلف أمراض الجهاز التنفسي في مواضيع الإنسان والحيوان. علينا أن نظهر بروتوكول الموجات فوق الصوتية الشاملة التي يستخدمها مختبر الدكتور تسوه لتحليل حركية الحجاب الحاجز وتحديدا في نماذج الماوس. وهذا هو أيضا أسلوب البحوث غير الغازية التي يمكن أن توفر معلومات كمية عن وظيفة الماوس العضلات التنفسية.

Abstract

تحليل وظيفة من القوارض عضلات الهيكل العظمي الجهاز التنفسي، وخصوصا الحجاب الحاجز، ويؤديها عادة من خلال عزل العضلات باستخدام شرائط العمليات الجراحية الغازية. على الرغم من أن هذا هو وسيلة فعالة لتقييم النشاط في الحجاب الحاجز المختبر، أنها تنطوي على عملية جراحية غير البقاء على قيد الحياة. تطبيق التصوير بالموجات فوق الصوتية غير الغازية باعتبارها الإجراء في الجسم الحي هو مفيد لأنه لا يقلل من عدد الحيوانات التضحية، ولكن هو أيضا مناسبة لرصد تطور المرض في الفئران الحية. وبالتالي، لدينا طريقة التصوير بالموجات فوق الصوتية قد يساعد على الأرجح في تطوير علاجات جديدة تخفف اصابة في العضلات الناجمة عن مختلف الأمراض التنفسية. ولا سيما، في التشخيصات السريرية لأمراض الرئة الانسدادي، والتصوير بالموجات فوق الصوتية لديه القدرة على استخدامها جنبا إلى جنب مع غيرها من الاختبارات القياسية للكشف عن الاصابة المبكرة من التعب في العضلات الحجاب الحاجز. في البروتوكول الحالي، نحن تصف كيفية تقييم بدقة الحجاب الحاجز contractility في نموذج الفأر باستخدام تقنية التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية.

Introduction

في الآونة الأخيرة، وقد تم تطبيق تقنيات التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية لنماذج الماوس من ارتفاع ضغط الدم الكلوية والبنكرياس 1،2 السرطان. ومع ذلك، لم تستخدم على نطاق واسع هذه التقنيات في القوارض الجهاز التنفسي وظيفة العضلات الفحص. لذلك، قمنا بتطوير طريقة التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية باعتبارها أداة قيمة لتقييم طولية في الجسم الحي من التنقل الحجاب الحاجز في الفئران.

وهناك العديد من المزايا لتصوير الموجات فوق الصوتية التشخيصية. على سبيل المثال، فمن موسع وآمنة، والمحمولة، ويسمح لقياس الوقت الحقيقي بتكلفة منخفضة نسبيا 3. بشكل خاص، وكانت قادرة على الكشف عن محاصرة الهواء، سمة السريرية لمرض الانسداد الرئوي المزمن (COPD) مع خفيفة الى الحد من تدفق الهواء الشديد 4 أجهزة معينة الموجات فوق الصوتية ذات التردد المنخفض. وبالتالي، التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية قد تكون بمثابة طريقة الفرز يمكن الوصول إليها بسهولة وقابلة للتكرار لرصد الوقت الحقيقي اضطرابات في الجهاز التنفسي.

يتم تطبيق تقنيات التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية في كثير من الأحيان إلى الحيوانات الكبيرة أو البشر. ومع ذلك، فقد كان هناك عدد محدود من الدراسات التصوير بالموجات فوق الصوتية على نماذج الماوس، والتي من المرجح نظرا للتحديات أداء الموجات فوق الصوتية على المواضيع نطاق صغير. يحدد البروتوكول الحالي إجراء رواية لقياس وظيفة الحجاب الحاجز في الماوس. بالإضافة إلى ذلك، وإن كانت هناك العديد من الدراسات القوارض على وظيفة الحجاب الحاجز، وقد تم توليد معظم النتائج من خلال عزل شرائح العضلات مباشرة من الحيوان الموت الرحيم 5-7. في المقابل، فإن التشخيص باستخدام طريقة التصوير بالموجات فوق الصوتية في الجسم الحي لتحليل النشاط الحجاب الحاجز تقليل ضحى عدد الحيوانات للتجريب. وعلاوة على ذلك، والعلاجات الطويلة الأمد التي تركز على تعزيز انقباض الحجاب الحاجز يمكن تقييمها بدقة عن طريق الموجات فوق الصوتية في نماذج القوارض دون التضحية الحيوانات.

ntent "> في مختبرنا، قمنا بتطوير وسيلة فعالة لتصور وكذلك تحليل الماوس النشاط الحجاب الحاجز باستخدام جهاز الموجات فوق الصوتية، مما يساعد على فهم وظيفة الحجاب الحاجز في الجسم الحي، ويتجنب أساليب الغازية للحيوانات، ويساعد في تطوير العلاجية علاجات لضعف الجهاز التنفسي.

Protocol

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تجرى على الحيوانات والانتهاء وفقا والامتثال والمؤسسية جنة رعاية الحيوان واستخدام جامعة ولاية أوهايو (IACUC) اللوائح والمبادئ التوجيهية. 1. ماوس التخدير <li style=";text-align:right;…

Representative Results

وأظهرت صورة الموجات فوق الصوتية نموذجية من الحجاب الحاجز الماوس في الشكل 1A. وسجلت تشريد العمودي القصوى الماوس الحجاب الحاجز. تم حساب هذه المسافة عن طريق قياس بدقة عمق حركة الحجاب الحاجز من الاسترخاء إلى انكماش باستخدام الفرجار الالكترونية التي هي جزء من بر?…

Discussion

بروتوكول التجريبية الحالية تطور تقنيات التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية محددة للنشاط الحجاب الحاجز في نموذج الفأر من خلال ذلك، في الجسم الحي النهج غير الغازية. إعدادات جهاز التخدير هي قيم تقريبية، والتي قد يتم تعديلها بشكل طفيف لكل حيوان منذ الفئران الف?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

ويدعم هذا العمل من المنح المقدمة من الصندوق العام وصندوق OU G110 التميز البحثي للبحوث الطبية الحيوية وجامعة ولاية أوهايو-HRS صندوق 013000. فإن الكتاب أود أن أشكر لورين تشن لمساعدتها في إعداد هذه المخطوطة.

Materials

Veterinary digital ultrasonic diagnostic imaging system Edan DUS 3 VET Ultrasound parameters include: frequency of 6.5 MHz, Depth of 29 mm. Note: An equivalent ultrasound machine may be used for this protocol
Micro-convex array transducer Edan C611 Or equivalent
GE Logiq i hand-carried unit (HCU)  GE Healthcare GE Logiq i hand-carried unit (HCU)  Or equivalent
GE 12 MHz linear array probe GE Healthcare 12L-RS Or equivalent
Veterinary anesthetic vaporizer Webster Veterinary Serial #: W422021 Isoflurane was exclusively used with this vaporizer (or equivalent). A custom made induction chamber for anesthesia was assembled for initial anesthesia. Maintenance anesthesia was performed using a nose cone
Isothesia (Isoflurane, USP) Butler Schein 29405 250ML PVL Or equivalent
Enviro-pure anesthesia absorbing canister Surgivet Smiths Medical PM, Inc. Part #: 32373B10 Or equivalent
Ultrasound transmission gel HM Sonic N/A Or equivalent 
Puralube vet ointment Puralube  NDC 17033-211-38 Or equivalent
Deltaphase isothermal pad Braintree Scientific Inc. 39DP Or equivalent
Hair remover Nair N/A Or equivalent
Electric razor Remington HC-5015 Or equivalent
Surgical tape 3M Micropore 1530-1 Or equivalent
Gauze sponges Dynarex 3262 Or equivalent

References

  1. Snyder, C. S., et al. Complementarity of ultrasound and fluorescence imaging in an orthotopic mouse model of pancreatic cancer. BMC Cancer. 9, 106 (2009).
  2. Franchi, F., et al. Non-invasive assessment of cardiac function in a mouse model of renovascular hypertension. Hypertension Research: Official Journal of the Japanese Society of Hypertension. , (2013).
  3. Coatney, R. W. Ultrasound imaging: principles and applications in rodent research. ILAR Journal / National Research Council, Institute of Laboratory Animal Resources. 42, 233-247 (2001).
  4. Morenz, K., et al. Detection of air trapping in chronic obstructive pulmonary disease by low frequency ultrasound. BMC Pulmonary Medicine. 12, 8 (2012).
  5. Gilliam, L. A., Moylan, J. S., Ann Callahan, L., Sumandea, M. P., Reid, M. B. Doxorubicin causes diaphragm weakness in murine models of cancer chemotherapy. Muscle & Nerve. 43, 94-102 (2011).
  6. Ferreira, L. F., Campbell, K. S., Reid, M. B. Effectiveness of sulfur-containing antioxidants in delaying skeletal muscle fatigue. Medicine and Science in Sports and Exercise. 43, 1025-1031 (2011).
  7. Zuo, L., Clanton, T. L. Reactive oxygen species formation in the transition to hypoxia in skeletal muscle. American Journal of Physiology. Cell Physiology. 289, 207-216 (2005).
  8. Helms, M. N., Torres-Gonzalez, E., Goodson, P., Rojas, M. Direct tracheal instillation of solutes into mouse lung. J. Vis. Exp. , (2010).
  9. Hedrick, W. R., Hykes, D. L., Starchman, D. E. . Ultrasound Physics and Instrumentation. , 445 (2005).
  10. von Sarnowski, B., Khaw, A. V., Kessler, C., Schminke, U. Evaluation of a microconvex array transducer for the ultrasonographic examination of the intrathoracic segments of the supraaortic arteries. Journal of Neuroimaging: Official Journal of the American Society of Neuroimaging. 20, 246-250 (2010).
  11. Stocksley, M. . Abdominal Ultrasound. , 7-8 (2001).
  12. Kremkau, F. W., Taylor, K. J. Artifacts in ultrasound imaging. Journal of Ultrasound in Medicine: Official Journal of the American Institute of Ultrasound in Medicine. 5, 227-237 (1986).
  13. Kremkau, F. W. Diagnostic Ultrasound: Principles and Instruments. Saunders Elsevier. , 521 (2006).
  14. Laing, F. C., Kurtz, A. B. The importance of ultrasonic side-lobe artifacts. Radiology. 145, 763-768 (1982).
  15. Abu-Zidan, F. M., Hefny, A. F., Corr, P. Clinical ultrasound physics. Journal of Emergencies, Trauma, and Shock. 4, 501-503 (2011).
  16. Gargani, L. Lung ultrasound: a new tool for the cardiologist. Cardiovascular Ultrasound. 9, 6 (2011).
  17. Sanders, R. C., Winter, T. . Clinical Sonography A Practical Guide. , 632 (2007).

Play Video

Cite This Article
Zuo, L., Roberts, W. J., Evans, K. D. Diagnostic Ultrasound Imaging of Mouse Diaphragm Function. J. Vis. Exp. (86), e51290, doi:10.3791/51290 (2014).

View Video