我们报告一个幼稚多能隔离的皮肤衍生成前体细胞(SKP)的从初级人类成纤维细胞培养的方法。我们表明,这些SKPS来自成纤维细胞培养干细胞有着相似的属性直接来源于人体皮肤活检的。这些细胞表达神经嵴标记,巢蛋白,除了如OCT4和Nanog的多能标记。
在过去的十年中,一些成人干细胞种群已确定在人体皮肤1-4。多能成体皮肤前体的隔离首先报道了米勒楼D实验室5,6。这些早期的研究描述了一种多能前体细胞人口从成年哺乳动物真皮5。这些细胞-称为SKPS,皮肤源性前体-从啮齿目动物和人体皮肤进行分离和扩增和分化成神经和中胚层的后代,包括从来没有发现在皮肤的细胞类型,如神经元5。免疫细胞化学对培养SKPS的研究发现,细胞表达波形蛋白和巢蛋白,中间丝蛋白的表达在神经和骨骼肌中的前体,另外,纤连蛋白和多能干细胞的标记物6。到现在为止,已分离出的成体干细胞人口SKPS的新鲜采集的哺乳动物皮肤活检。
我们利用这些研究结果,建立初级成纤维细胞培养,可随时从世界各地的银行组织( 图1)的成人干细胞的快速分离的协议。此方法具有重要的意义,因为它允许隔离前体细胞皮肤样本时无法访问而纤维母细胞可能是从组织银行,从而打开了新的机遇,剖析罕见的遗传性疾病的分子机制,以及在建模疾病菜。
使用本文所述的方法,的天真皮肤干细胞可以分离出原代皮肤成纤维细胞培养。使用这种方法,我们最近报道的来自患者患有一种罕见的遗传性综合征,哈钦森-Gilford早衰综合症7成纤维细胞培养成体干细胞分离和鉴定。此处显示这些前体细胞表达干细胞标记物是能够自我更新和定向分化成不同的细胞系,包括成纤维细胞和平滑肌细胞(请参阅图4 Wenzel 等人 ,2012)7?…
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由亚历山大·冯·洪堡基金会(5090371),恭Kuhne将过敏研究和教育中心(CK-CARE),和Bayerischen Staatsministerium(KD)的支持。