Dieser Artikel beschreibt eine Methode zur Visualisierung rat Hirnarterien durch ein Schädel-Fenster mit zeitlicher Kraniektomie um proximalen Abschnitte der mittleren Hirnarterie anzusehen (<strong> Abbildung 1</strong>). Diese Methode lässt sich mit verschiedenen Techniken von Drug-Delivery kombiniert werden, um Hirnarterie Reaktivität zu messen<em> In vivo</em>.
Erstellung eines Schädel-Fenster ist eine Methode, die eine direkte Visualisierung der Strukturen ermöglicht auf der kortikalen Oberfläche des Gehirns 1-3. Diese Technik kann an verschiedenen Orten, die über der Ratte Cerebrum durchgeführt werden, sondern ist am einfachsten durch die Schaffung eines Kraniektomie über den leicht zugänglichen frontalen oder Scheitelbeine durchgeführt. Am häufigsten haben wir diese Technik in Kombination mit dem Endothelin-1 cerebri Arterienverschluss Modell eines ischämischen Schlaganfalls, um die Änderungen in der mittleren zerebralen Arterie Gefäßdurchmesser, der mit Einspritzung von Endothelin-1 treten in das Hirnparenchym angrenzend an das proximale MCA quantifizieren 4, 5. Um den proximalen Abschnitt des MCA während Endothelin induzierten -1 MCAO visualisieren, verwenden wir eine Technik, um ein Fenster durch die kraniale Schläfenbein auf der lateralen Seite des Schädels Ratte (Abbildung 1) zu schaffen. Hirnarterien können entweder mit der Dura intakt oder mit der Dura eingeschnitten und retra visualisiert werdenCTED. Am häufigsten, verlassen wir die Dura intakt während der Visualisierung, da Endothelin-1-induzierten MCAO beinhaltet Lieferung der gefäßverengende Peptids in das Hirnparenchym. Dies umgeht die Notwendigkeit, die Dura direkt über einzuschneiden visualisierter Behältern zur Medikamentenabgabe. Dieses Protokoll wird beschrieben, wie ein Schädel Fenster Hirnarterien in einer stufenweisen Weise visualisieren, und wie viele der möglichen Gefahren im Zusammenhang mit dieser Methode zu vermeiden erstellen.
Zusammenfassend ist das kraniale Fenster Präparationstechnik sehr vielseitig wie sie kann geändert werden, um den Anforderungen vieler Versuche mit geringfügigen Modifikationen 4, 5 erfüllen. Zum Beispiel haben wir erfolgreich zerebralen Blutflusses in bestimmten MCA Niederlassungen mittels Laser-Doppler-Flussmessung direkt konzentrieren sich auf eine Hirnarterie visualisiert durch ein Schädel-Fenster (Mekka AP 2009 und 2011) überwacht. Zusätzlich kann eine ähnliche Zubereitung mit der Dura mit einges…
The authors have nothing to disclose.
Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse aus dem American Heart Association Großraum Southeast Affiliate (09GRNT2060421), die American Medical Association, und von der University of Florida Clinical and Translational Science Institute unterstützt. Adam Mekka ist eine NIH / NINDS, NRSA Chemiefonds fellow (F30 NS-060.335). Robert Regenhardt erhalten Promotionsstipendium Unterstützung von der University of Florida Multidisziplinäre Training Program in Hypertension (T32 HL-083810).
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Inhalation anesthesia system | VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA | 901806 | |
Isoflurane anesthetic | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA | 1001936060 | |
Small animal stereotaxic system | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 900 | |
Non-rupture ear bars, rat | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 957 | |
Rat gas anesthesia head holder | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 1929 | |
BAT-12 microprobe thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12 | |
T/PUMP, Thermal blanket | Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA | T/PUMP, TP600 | |
Metzenbaum Scissors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501254 | |
Iris forceps | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 15915 | |
Bulldog clamp retractors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14119-G | |
10 μl syringe 26-gaugue | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | SGE010RNS | |
Bovie, high temperature cautery kit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500392 | |
Rat tooth forceps 0.12 | Stotz | E1811 | |
Micromotor drill | Stoelting, Wood Dale, IL, USA | 51449 | |
0.8 mm round drill bur | Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA | RS-6280C-1 | |
STORZ Bonn suturing forceps | Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA | ||
Nylon Suture, size 3.0 | Oasis, Mettawa, IL, USA | MV-663 | |
Cotton swabs | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 22-029-488 | |
Puralube eye ointment | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | NC0138063 | |
Electric hair clippers | Oster, Providence, RI, USA | 78005-301 | |
ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS | American Peptide, Sunnyvale, CA, USA | 88-1-10A | |
Chlorhexidine, 2% | Agrilabs, St. Joseph, MO, USA | 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322 | |
Surgical microscope | Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA | Evolution xR6 | |
Sony Handycam | Sony, Minato, Tokyo, Japan | HDR-SR12 | |
Fiber optic illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
VLC media Player | (Paris, France) | ||
Image J software | U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA |