Bir Ortotopik Fare Beyin Tümörü Modelinde Kombinasyon Radyoterapi
Summary
Bu makalenin amacı, kemoradyoterapi çalışmaları için ortotopik glioblastoma modelinin kullanımı tanımlamaktır. Bu makale implante, hücre işleme rağmen gitmek ve bir intrakraniyal modeli kullanarak farenin radyoterapi olacaktır.
Abstract
Glioblastoma multiforme (GBM) 1 en yaygın ve agresif erişkin primer beyin tümörlerdir. Son yıllarda da, tümör mekaniğinin anlaşılması konusunda önemli ilerleme olmuştur ve tümörün doğrudan intraserebral inokülasyonu fizyolojik olarak uygun ortamda 2 invaziv süreci gözlemleme fırsatı sağlar etti. Bildiğim kadarıyla insan beyin tümörleri ile ilgili olarak, mevcut ortotopik modelleri karmaşık bir kraniotomi prosedürü 3 ile tümörün sağlam bir parça hücre süspansiyonları veya implantasyon stereotaksik enjeksiyon yoluyla kurulur. Bizim teknik olarak beynin doğrudan implant kullanılan bir hücre süspansiyonu oluşturmak için doku kültürü hücreleri toplamak. Cerrahi süresi yaklaşık 30 dakika ve fare sabit bir cerrahi düzlemi içinde olması gerekmektedir olarak, enjekte edilebilir bir anestezik kullanılır. Fare Stoetling (Şekil 1) tarafından yapılan bir stereotaksik jig yerleştirilir. Kıçtaer cerrahi alan temizlenir ve hazırlanır, bir kesi yapılır ve bregma kraniotomi yerini belirlemek için yer almaktadır. Kraniotomi yeri sağ 2 mm ve bregma için rostral 1 mm'dir. Derinliği kafatası yüzeyinden 3 mm'dir ve hücreler 2 ul her bir 2 dakika arasında bir hızla enjekte edilir. Cilt 5-0 PDS ile sütüre edilir ve farenin bir ısıtma yastığı uyanmak için izin verilir. Bizim deneyim, hücre serisine bağlı olarak, cerrahi tedavi sonrası 7-10 gün arasında yer alabilir. İlaç dağıtım ilaç bileşimi bağlıdır. Radyasyon tedavisi için fareler anestezi, ve jig yapılan özel koymak. Kurşun farenin vücudu kaplar ve farenin sadece beynin ortaya koyar. Tümörogenez ve GBM için yeni tedavilerin değerlendirilmesi çalışması doğru ve tekrarlanabilir beyin tümörü hayvan modelleri gerektirir. Böylece YÜRÜRLÜK test etmek, beynin mikro ve tümörün etkileşimi incelemek için bu ortotopik beyin modeli kullanınradyasyon olan ve olmayan farklı terapötik ajanların ess.
Protocol
Discussion
Gibi glioblastoma multiforme Malign gliom, en sık rastlanan primer beyin tümörleri temsil ve kasvetli bir prognoz 4 var. GBM etkilenen hastaların sağkalım cerrahi, radyasyon ve kemoterapi 5 gelişmelere rağmen (9-12 yani ay sonrası tanı) son on yılda hemen hemen hiç değişmedi. Hücrelerinin, insan gliom histolojik özellikleri mümkün olduğunca yakın benzerlik olmalıdır;; tahmin edilebilir bir büyüme olmalıdır glioma muamele çalışma için uygun bir model özellikleri tekrar…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu araştırma NIH Intramural programından fon tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
| Betadine | 100% EtOH |
| 70% EtOH | 50% Acetone |
| 6″ Q-tips | Alcohol swabs |
| Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
| 1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
| 25G needles | Heating pad |
| Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |
References
- Bleau, A. M., Holland, E. Trapping the mouse genome to hunt human alternations. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 104, 7737-7738 (2007).
- McGrady, B. J., McCormick, D. A murine model of intracranial invasion: morphological observations on central nervous system invasion by melanoma cells. Clin. Exp. Metastasis. 10, 387-393 (1992).
- Fei, X., Zhang, Q., Dong, J., Diao, y., Wang, Z., Li, R., Wu, Z., Wang, A., Lan, Q., Zhang, S., Huang, Q. Development of clinically relevant orthotopic xenograft mouse model of metastatic lung cancer and glioblastoma through surgical tumor tissues injection with trocar. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 29, 84-84 (2010).
- Fujita, M., Zhu, X., Sasaki, K., Ueda, R., Low, K., Pollack, I., Okada, H. Inhibition of STAT3 Promotes the Efficacy of Adoptive Transfer Therapy Using Type-1 CTLs by Modulation of the Immunological Microenvironment in a Murine Intracranial Glioma. J. Immunol. 180, 2089-2098 (2008).
- Candolfi, M., Curtin, J. F., Nichols, W. S., Muhammad, A. K. M. .. . G., King, G., Pluhar, G. D., McNiel, G. E., Ohlfest, E. A., Freese, J. R., Moore, P. F. Intracranial glioblastoma models in preclinical neuro-oncology: neuropathlogical characterization and tumor progression. J. Neurooncol. 85, 133-148 (2007).
- Kaye, A., Morstyn, G., Gardner, I., Pyke, K. Development of a xenograft glioma model in mouse brain. Cancer Research. 46, 1367-1373 (1986).
- Zhao, Y., Xiao, A., diPierro, C., Carpenter, J., Abdel-Fattah, R., Redpath, G., Lopez, M., Hussaini, I. An Extensive Invasive Intracranial Human Glioblastoma Xenograft Model. American Journal of Pathology. 176, 3032-3049 (2010).
- Learn, C., Grossi, P., Schmittling, R., Xie, W., Mitchell, D., Karikari, I., Wei, Z., Dressman, H., Sampson, J. Genetic Analysis of Intracranial Tumors in a Murine Model of Glioma Demonstrate a Shift in Gene Expression in Response to Host Immunity. J. Neuroimmunol. 182, 63-72 (2007).
- Martens, T., Laabs, Y., Günther, H., Kemming, D., Zhu, Z., Witte, L., Hagel, C., Westphal, M., Lamszus, K. Inhibition of Glioblastoma Growth in a Highly Invasive Nude Mouse Model Can Be Achieved by Targeting Epidermal Growth Factor Receptor but not Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2. Clin. Cancer Res. 14, 5447-5458 (2008).
- Purow, B., Schiff, D. Advances in the genetics of glioblastoma: are we reaching critical mass. Nat. Rev. Neurol. 5, 419-426 (2009).
