يتم تطبيق تلألؤ بيولوجي التصوير من نقص الأكسجة النشاط عامل محرض 1α لرصد نقص الأكسجة الورم داخل القحف التنمية في الدماغ سرطان الثدي نموذج الفأر الانبثاث.
ومن المعروف جيدا أن نقص الأكسجة الورم يلعب دورا هاما في تعزيز التقدم الخبيثة والتي تؤثر سلبا على استجابة علاجية. هناك القليل من المعرفة حول في الموقع ، ونقص الأكسجين ، فيفو ورم داخل الجمجمة من خلال تطوير أورام الدماغ الخبيثة بسبب الافتقار إلى وسائل فعالة لرصد ذلك في هذه الأورام العميقة الجذور مثلي. التصوير تلألؤ بيولوجي (BLI) ، استنادا إلى الكشف عن الضوء المنبعث من الخلايا الحية التي تعبر عن الجين luciferase ، اعتمد بسرعة لأبحاث السرطان ، وخاصة لتقييم نمو الأورام أو التغيرات في حجم الورم الاستجابة للعلاج في الدراسات الحيوانية قبل السريرية. علاوة على ذلك ، معربا عن الجين مراسل تحت سيطرة تسلسل المروج ، يمكن رصد الجينات المحددة غير جراحية بواسطة BLI. تحت ضغط نقص الأوكسجين ، وتوسط الاستجابات يشير أساسا عن طريق عامل محرض نقص الأكسجة 1α (مؤسسة الحرمين ، 1α) لمحرك النسخ من الجينات المختلفة. ولذلك ، فقد استخدمنا بناء مؤسسة الحرمين مراسل – 1α ، 5HRE ونيف لوك ، transfected ستابلي في سرطان الثدي البشرية MDA – MB231 يتم تنفيذ الخلايا (MDA-MB231/5HRE-ODD-luc) ، وفي الفحص المختبري تلألؤ بيولوجي مؤسسة الحرمين ، التي 1α تفرخ الخلايا transfected ميتة في غرفة (0.1 ٪ O 2) لمدة 24 ساعة قبل BLI ، في حين أن الخلايا في normoxia (21 ٪ O 2) بمثابة السيطرة. تدفق الفوتون أعلى بكثير لوحظ نقص الأكسجة الخلايا تحت تقترح زيادة مؤسسة الحرمين – 1α ملزمة لمروج والخمسين (HRE العناصر) ، بالمقارنة مع تلك الموجودة في normoxia. يتم حقن الخلايا مباشرة في مخ الفأر لإنشاء نموذج الدماغ سرطان الثدي ثانوي لورم خبيث. التصوير في تلألؤ بيولوجي فيفو ديناميات نقص الأكسجة الورم يبدأ 2 أسبوعا بعد زرع وكرر مرة واحدة في الاسبوع. BLI يكشف زيادة الإشارات الضوئية من الدماغ كما تقدم الورم ، مشيرا الى زيادة نقص الأكسجة الورم داخل القحف. وتستخدم الدراسات النسيجية والمناعية لتأكيد نتائج التصوير في الجسم الحي. هنا ، سوف نقدم للمناهج في فحص المختبر تلألؤ بيولوجي – 1α مؤسسة الحرمين ، وإنشاء الجراحي للورم خبيث في الدماغ سرطان الثدي في ماوس عارية وتطبيقها في مجال التصوير تلألؤ بيولوجي المجراة داخل الجمجمة لرصد نقص الأكسجة الورم.
ورم خبيث في الدماغ سرطان الثدي يحدث في 30 ٪ من مرضى سرطان الثدي في المرحلة الرابعة. يترافق ذلك مع ارتفاع معدلات المراضة والوفيات ومتوسط البقاء على قيد الحياة لديه 13 شهرا 6. هناك حاجة إلى نماذج حيوانية مناسبة لتقليد هذا المرض المدمر سريريا من أجل تسهيل فهمنا لل?…
The authors have nothing to disclose.
وتدعم هذه الدراسة في جزء من سرطان الثدي DOD جائزة IDEA W81XWH – 08 – 1 – 0583 والمعاهد الوطنية للصحة / NCI CA141348 – 01A1 (DZ) وجائزة العلوم السريرية FAMRI (DS). يتم توفير البنية التحتية من خلال برنامج تصوير الحيوانات الصغيرة جنوب غرب بحوث التصوير بدعم جزئي من U24 CA126608 سيمونز ومركز السرطان (P30 CA142543) ، والمعاهد الوطنية للصحة 1S10RR024757 – 01.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|
D-luciferin | Gold Biotechnology | L-123 | 120 mg/kg in PBS in a total volume of 80 μl for in vivo study |
Isoflurane | Baxter International Inc. | 1001936060 | |
Matrigel | BD Biosciences | 354234 | |
Hamilton syringe | Hamilton Company | 1701 | |
32G Hamilton needle | Hamilton Company | 7803-04 | |
Hypoxia chamber | Billups-Rothenberg, Inc. | MIC-101 | |
Bioluminescence imaging system | Caliper Life Sciences | IVIS Spectrum system | |
G418 | Fisher scientific | SV3006901 |