インフルエンザウイルスとの同時感染は無症候性の中に侵襲性肺炎球菌疾患の誘導に関与する要因の一つです。<em>肺炎球菌</em>キャリッジ。ここでは、これら2つの呼吸器病原体の間に相乗効果を調査するために乳児のマウスを用いて混合感染の方法を説明します。
全世界で約50万人を殺した1918年のインフルエンザウイルスのパンデミック、中に、死者の大半は、インフルエンザウイルス単独感染の結果ではなかった。代わりに、ほとんどの個体は主に細菌肺炎球菌 (肺炎球菌)によって引き起こされる、二次的細菌感染に屈していると考えられている。インフルエンザウイルスや肺炎球菌によって引き起こされる感染症との間の相乗関係が続いて(1、2のレビュー)だけでなく、ウイルスの季節的流行時など、1957年アジアインフルエンザウイルスのパンデミックの間に観察されている。ここでは、同時インフルエンザウイルスとS.の結果として増加する罹患率に関与することができる機構(s)を調査するために使用されるプロトコルについて説明肺炎の感染症。我々は、確実にかつ再現性S.を保菌してマウスのインフルエンザウイルス感染の効果を実証するために乳児マウスモデルを開発している肺炎 。このプロトコルを使用して、我々 は 、in vivoイメージング3 で使用して共同収容、新生マウスの間に肺炎球菌感染の動態に最初の洞察を提供している。
IVISのマシンとのin vivoイメージングでは微生物の病原性4、6-9のリアルタイム可視化を可能にする独自の方法論です。ここで、我々はS.の間に相乗効果を理解するために、この技術の応用を示す乳児マウスにおける肺炎およびインフルエンザウイルス。この手法の非侵襲的な性質のため、我々は時間の経過とともに、個々のマウスにおける感染症の進行を監視することができた。これは、共同収容乳児マウス3の間で肺炎球菌感染の動態を文書化することができるようになりました。この手法の非侵襲的な性質は、実験ごとの少ない動物を使用し、それゆえ動物の使用量を削減するための研究が可能になります。それは、体内の感染症の未知の部位に感染の普及を視覚化するだけでなく、容易に解離(など中耳など)でサンプリングされないサイトにIVISマシンを使用することも可能です。
イメージング実験を始める前に、我々は生物発光EF3030株の植民地化のレベルが組織ホモジネート中の生菌数を列挙することにより、親EF3030ひずみの植民地化のレベルに匹敵することを確認した。さらに、我々は最初のインフルエンザウイルスによる感染がの鼻咽頭に生物発光EF3030の負荷の増大をもたらしたことを確認した親EF3030株(結果は示していない)で示したように動物を植民地化。
IVIS技術は操作が簡単であり、データを理解するために、再現性があり簡単に生成しながら、実験は慎重に技術の感度とユーティリティが最大となるように設計されている必要があります。例えば、IVISのカメラの感度は、私たちの経験では、肺から発生する生物発光シグナルの検出限界を向上させる組織8の深さと不透明度に影響されます。さらに、暗い毛皮と色素沈着した皮膚は程度8(ヘアレスマウスに比べて)10倍などで光透過率を低減します。この方法を開発する一方で、我々は5〜14日齢のC57BL / 6マウスで使用するためにこのプロトコルを最適化して、それ以来、IVISがbioluminescent Sで 20日齢のC57BL / 6マウスの定着を検出するために使用できることを実証している肺炎 EF3030。これらの実験は、ヌードやBALB / cマウスで実行されるときにしかし、信号の検出を増加させることができる。それにもかかわらず、IVISのカメラは、監視の特性と、最終的にインフルエンザウイルス感染後の肺炎球菌疾患のin vivoでの開発で理解するために新しいアプローチを表しています。
The authors have nothing to disclose.
著者は、技術的にはデビッドブリル(バーミンガム、AL、米国のアラバマ大学)から助言に感謝したい。我々は、動物福祉と倫理に関する有用な提案や議論のためにイヴェットチェン、メルボルン大学の動物福祉司、デビッドテイラー、動物施設の管理を、感謝したいと介入の基準と説明した実験用の人道的エンドポイントの開発になりますこの原稿インチ
Odilia Wijburgとパトリック読書がNHMRC RDライトフェローシップでサポートされている、カースティショートは、GSKの大学院支援助成金とPuzey奨学金によってサポートされています。