والعدوى المتزامنة مع فيروس الأنفلونزا A هو واحد من العوامل المتورطة في تحريض أمراض الرئوية الغازية خلال أعراض<em> العقدية الرئوية</em> النقل. نحن هنا وصفا لطريقة العدوى المختلطة باستخدام الفئران الرضع للتحقيق في تآزر بين هذه العوامل الممرضة two الجهاز التنفسي.
خلال وباء فيروس الإنفلونزا عام 1918 ، التي قتل فيها ما يقرب من 50 مليون شخص في العالم ، كانت الغالبية العظمى من القتلى لم يكن نتيجة للعدوى بفيروس الانفلونزا وحدها. بدلا من ذلك ، يعتقد معظم الأفراد أن يستسلم لعدوى بكتيرية ثانوية ، والناجمة في الغالب عن بكتيريا المكورات العقدية الرئوية (المكورة الرئوية و). وقد تم لاحقا علاقة التعاون بين العدوى الناجمة عن فيروس الإنفلونزا والمكورة الرئوية والتي لوحظت خلال 1957 جائحة فيروس الآسيوية ، وكذلك أثناء الفاشيات الموسمية من فيروس (مراجعة في 2 ، 1). هنا ، نحن تصف بروتوكول يستخدم لتحقيق هذه الآلية (ق) التي يمكن أن تشارك في زيادة معدلات الإصابة بالمرض نتيجة لفيروس انفلونزا المتزامنة وس. الرئوية العدوى. وقد طورنا نموذجا لموثوق الفئران الرضع والتظاهر بتكاثر آثار عدوى فيروس الانفلونزا من الفئران مع المستعمر س. الرئوية. باستخدام هذا البروتوكول ، وقدمنا رؤية واضحة لأول مرة في حركية انتقال الالتهاب الرئوي بين المشارك يضم الفئران حديثي الولادة به في مجال التصوير فيفو 3.
في الجسم الحي مع آلة التصوير IVIS هي منهجية فريدة من نوعها تسمح التصور في الوقت الحقيقي من الجراثيم المرضية 4 ، 6-9. هنا ، ونعرض في تطبيق هذه التكنولوجيا لفهم التآزر بين س. الرئوية والأنفلونزا فيروس في الفئران الرضع. نظرا للطبيعة غير الغازية من هذه التقنية ، تمكنا من رصد تطور العدوى في كل فأر الفردية على مر الزمن. وقد أتاح لنا هذا لتوثيق حركية انتقال الالتهاب الرئوي بين الفئران الرضع المشارك يضم 3. الطبيعة غير الغازية من هذه التقنية تمكن الباحثون لاستخدام عدد أقل من الحيوانات في التجربة وبالتالي الحد من استخدام الحيوانات. ومن الممكن أيضا استخدام الجهاز لتصور IVIS نشر العدوى إلى مواقع غير معروفة سابقا للعدوى في الجسم ، فضلا عن عينات من مواقع لا بسهولة عن طريق تشريح (مثل الأذن الوسطى).
قبل الشروع في تجارب التصوير ، وأكدنا أن مستويات الاستعمار من سلالة EF3030 bioluminescent كانت مماثلة للمستويات الاستعمار من سلالة EF3030 الأصل بواسطة تعداد عدد قابلة للحياة في الخليط الأنسجة. بالإضافة إلى ذلك ، أكد لنا أولا أن العدوى بفيروس الأنفلونزا أسفرت عن زيادة الحمولة bioluminescent EF3030 في البلعوم الأنفي للاستعمار الحيوانات كما هو موضح مع سلالة EF3030 الأصل (النتائج غير معروضة).
في حين أن التكنولوجيا IVIS من السهل أن تعمل ويولد استنساخه وسهلة الفهم البيانات ، لا بد من التجارب مصممة بعناية بحيث يتم تكبير حساسية وفائدة هذه التكنولوجيا. على سبيل المثال ، تتأثر حساسية الكاميرا IVIS من عمق والتعتيم من النسيج 8 ، والتي في تجربتنا ، ويزيد من حد الكشف عن إشارات مصدرها bioluminescent الرئتين. بالإضافة إلى ذلك ، الفرو والجلد الداكن المصطبغة يقلل من انتقال الضوء بمقدار 10 أضعاف (بالمقارنة مع الفئران أصلع) 8. في حين أن تطوير هذا الأسلوب ، ونحن على هذا البروتوكول الأمثل للاستخدام مع C57BL يوم 5-14 القديمة / 6 و الفئران أظهرت منذ عام والتي يمكن استخدامها للكشف عن IVIS استعمار القديم C57BL 20 يوما / 6 مع الفئران S. bioluminescent EF3030 الرئوية. ومع ذلك ، قد يتم الكشف عن زيادة إشارة عندما يتم تنفيذ هذه التجارب على الفئران عارية أو BALB / ج. ومع ذلك ، الكاميرا IVIS يمثل نهجا جديدا لرصد وتوصيف وفهم في نهاية المطاف في تطوير المجراة من داء المكورات الرئوية التالية الأنفلونزا من عدوى الفيروس.
The authors have nothing to disclose.
فإن الكتاب أن نعترف المشورة الفنية من Briles ديفيد (جامعة ألاباما في برمنغهام ، ألاباما ، الولايات المتحدة). نود أن نشكر إيفيت تشن ، موظف رعاية الحيوان من جامعة ملبورن ، وديفيد تايلور ، مدير مرفق الحيوان ، للحصول على اقتراحات مفيدة ومناقشات بشأن الرفق بالحيوان والأخلاق ووضع معايير التدخل ونقطة نهاية للتجارب إنسانية صفها في هذه المخطوطة.
معتمدة أوديليا Wijburg والقراءة من قبل باتريك رايت زمالة NHMRC RD ، يتم اعتماد كيرستي قصيرة من الدعم GSK منح دراسات عليا ومنحة Puzey.