מחלת פרקינסון כבר קשור לחשיפה לחומרי הדברה. כאן אנו מציגים שיטה כדי לספק חומרי הדברה באמצעות צינור קיבה בריכוז הרצוי שיטה לנתח את ההשפעה שלהם הצטברות אלפא synuclein במערכת העצבים enteric.
Abstract
ב (PD) ומחלת פרקינסון המטופלים, את הפתולוגיה הקשורה כדלקמן דפוס אופייני מעורבים בין היתר 1,2 enteric העצבים (ENS) מערכת, את הנורה חוש הריח (OB), הגרעין מנוע הגבי של התועה (משרד הרישוי) 3, intermediolateral גרעין של 4 חוט השדרה ואת nigra substantia, שסיפק את הבסיס ביים את neuropathological של המחלה 4,5. ENS ו OB הם מבנים העצבים חשופים ביותר הראשונים להיות מושפעים. מעניין, פ"ד כבר הקשורים לחשיפה לחומרי הדברה 6-8. כאן אנחנו מראים בפירוט שתי שיטות השתמשו במחקר הקודם שלנו 9. כדי לנתח את ההשפעות של rotenone משחק מקומי על ENS, אנו rotenone מנוהל באמצעות gavage כדי שנה אחת C57/BL6 עכברים ישנים. Rotenone היא שימוש נרחב בחומרי הדברה, כי בתוקף מעכב קומפלקס המיטוכונדריה אני 10. זה lipophylic מאוד ונספג היטב את מערכת העיכול 11. התוצאות שלנו הראו כי הממשל של 5 מ"ג / ק"ג של rotenone לא לעכב קומפלקס המיטוכונדריה אני בפעילות השריר או המוח. לפיכך, טוען כי באמצעות שיטת הממשל שלנו rotenone לא לחצות את מערכת hepatoportal והיה פועל אך ורק על ENS. כאן אנו מציגים שיטה לנהל הדברה באמצעות gavage ואת פרוטוקול ניתוח תמונת להשתמש כדי לנתח את ההשפעות של חומרי הדברה ב הצטברות אלפא synuclein ב ENS. החלק הראשון מציג שיטה המאפשרת ניהול intragastric של חומרי הדברה (rotenone) בריכוז המדויק הרצוי. השיטה השנייה מראה חצי אוטומטי ניתוח התמונה פרוטוקול לנתח אלפא synuclein הצטברות של ENS באמצעות תוכנת ניתוח התמונה.
Protocol
1) מינהל Intragastric של Rotenone לשקול את בעל החיים. חשב את הנפח הכולל של פתרון rotenone / רכב הצורך. במקרה זה 0.01 מ"ל לגרם משקל בעל החיים. טעינת מזרק 1 מ"ל עם נפח של פתרון מחושב…
Discussion
הממשל Intragastric שבוצעה בעבר 12. עם זאת, על פי כתב היד של Inden, rotenone היה מנוהל מומס מלח 0.5% carboxymethylcellulose נתרן (CMSS) לבד. Rotenone הוא חומר liphophylic גבוהה. לכן, rotenone לא יכול להיות מומס CMSS 0.5% בלבד ויהיה להאיץ אם נעשה כך. השימוש כלורופורם יוצר ההשעיה rotenone מופץ באופן שווה הימנעות משקעים…
Pan-Montojo, F. J., Funk, R. H. Oral Administration of Rotenone using a Gavage and Image Analysis of Alpha-synuclein Inclusions in the Enteric Nervous System. J. Vis. Exp. (44), e2123, doi:10.3791/2123 (2010).