De ziekte van Parkinson is gerelateerd aan de blootstelling aan pesticiden. Hier laten we een methode om pesticiden met behulp van een maagsonde in de gewenste concentratie en een methode om het effect te analyseren in de alfa-synucleïne accumulatie in het enterisch zenuwstelsel te leveren.
Bij de ziekte van Parkinson (PD) patiënten, de bijbehorende pathologie volgt een karakteristiek patroon met betrekking tot onder meer het enterisch zenuwstelsel (ENS) 1,2, de bulbus olfactorius (OB), de dorsale motor nucleus van de vagus (DMV) 3, de intermediolateral kern van het ruggenmerg 4 en de substantia nigra, die de basis vormen voor de neuropathologische enscenering van de ziekte 4,5. De ENS en de OB zijn de meest blootgestelde nerveuze structuren en de eersten die worden getroffen. Interessant is PD in verband gebracht met blootstelling aan pesticiden 6-8. Hier laten we in detail twee methoden die worden gebruikt in onze vorige studie 9. Om de effecten van rotenone handelen lokaal op de ENS analyseren, we worden toegediend met behulp van een maagsonde rotenon tot een jaar oud C57/BL6 muizen. Rotenon is een veel gebruikte bestrijdingsmiddel die sterk remt mitochondriaal complex I 10. Het is zeer lipofiele en slecht geabsorbeerd in het maag-darmkanaal 11. Onze resultaten toonden aan dat de toediening van 5 mg / kg van rotenon niet mitochondriaal complex I-activiteiten in de spier of de hersenen te remmen. Dus, wat suggereert dat het gebruik van onze administratie methode rotenon niet de hepatoportale systeem kruis en handelde uitsluitend op de ENS. Hier laten we een methode om pesticiden met behulp van een maagsonde en de beeldanalyse protocol dat wordt gebruikt om de effecten van het pesticide te analyseren in alfa-synucleïne accumulatie in het ENS te beheren. Het eerste gedeelte is een methode die intragastrische toediening van pesticiden (rotenon) maakt het mogelijk op een gewenste exacte concentratie. De tweede methode laat een semi-automatische beeldanalyse-protocol om alfa-synucleïne accumulatie te analyseren in de ENS met behulp van een beeldanalyse-software.
Maag administratie is al eerder uitgevoerd 12. Echter, volgens manuscript Inden's, rotenon werd toegediend opgelost in 0,5% carboxymethylcellulose natriumzout (CMSS) alleen. Rotenon is een hoog liphophylic stof. Daarom kan rotenon niet worden opgelost in 0,5% CMSS alleen en zal neerslaan zo gedaan. Het gebruik van chloroform ontstaat een gelijkmatig verdeeld rotenon opschorting te vermijden neerslag. Bovendien, als gevolg van de hogere concentraties van het bestrijdingsmiddel in de CMSS, wordt de definiti…
The authors have nothing to disclose.
De Pedro Barrie de la Maza stichting deze werkzaamheden ondersteund.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Rotenone | SIGMA-Aldrich | R8875 | Germany | |
Chloroform | Carl Roth | 3313.1 | Germany | |
Carboxymethylcellulose | SIGMA-Aldrich | C5678 | Germany | |
Gavage 1,2 mm x 60 mm | Unimed | Switzerland | ||
LSM 510 | Zeiss Microscopes | |||
FIJI | http://pacific.mpi-cbg.de |