Patch Kelepçe bir Karanlık adapte Dilim Hazırlık Fare Retina Nöronlar Kayıtlar
Summary
İşte biz elektrofizyolojik kayıtlar için fare retina karanlık adapte dilim üretmek için bir prosedür açıklanmaktadır.
Abstract
Bizim görsel deneyim retinal fotoreseptör görsel pigment fotonlar, ışık enerjisini emer ve hücre zarı siklik nükleotid kapılı kanallar kapatılmasına yol açan hücre içi olaylar zincirini başlatır zaman başlatılır. Membran potansiyeli ortaya çıkan değişiklik çubuk ve koni sinaptik terminalleri hem de nörotransmitter serbest miktarda azalma sırayla açar. Fotoreseptör membran potansiyeli ışık uyarılmış değişiklik retinada aşağı aktiviteye yol açar nasıl ölçmek için, bilim adamları onlarca yıl 1,2 retina dilim hazırlıkları elektrofizyolojik kayıtlar yaptık. Geçmişte bu dilimleri elle filtre kağıdı bağlı retina dokusunun bir jiletle kesilmiş; son yıllarda dilimleme başka bir yöntem, retina dokusunun düşük jelleşme sıcaklığı agar sayede gömülü geliştirilmiştir ve soğuk çözüm dilimlenmiş mikrotom titreşimli 3,4. Bu preparat ile retina dilimleri daha az yüzey hasarı ve çok sağlam bir ışık uyarılmış yanıtlar üretir. Burada bu yordamı görsel pigment beyazlatma önlemek için kızıl ötesi ışık altında nasıl yapılacağı belge.
Protocol
Discussion
Omurgalı retina Dilim kayıt onlarca yıl 1,2 için yapılmış ve retina devre olay ışık kodlar nasıl daha derin bir anlayış sağlama konusunda oldukça başarılı olmuştur. Titreşen bir mikrotom kesim yerine doğrudan daha bir jilet ile avantajları, retina dilimler yüzeyinde daha az hasar tabi ki. Emme pipet ile sadece hücre tipleri en çok 5,6 tespit edilmiştir retina devre, bağlantı korumak yüzeyinin altında bu hasar ve hedef sağlıklı hücreleri çıkarmak için kolay ve bu…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüsü, Hibe EY17606 (APS) tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micropipette Puller | Sutter Instruments | P-97 | ||
| Borosilicate glass | Sutter Instruments | B120-69-10 | ||
| Polyethylene tubing | Intramedic | PE205 | ||
| Agar | Sigma | A7002 | ||
| Low gelling temp agarose | Sigma | A0701 | ||
| Ames’ Medium | Sigma | A1420 | ||
| Penicillin-Streptomycin | Sigma | P0781 |
References
- Weblin, F. Transmission along and between rods in the tiger salamander retina. J Physiol. 280, 449-470 (1978).
- Wu, S. M. Synaptic connections among retina neurons in living slices. J Neurosci Methods. 20, 139-149 (1987).
- Rieke, F. Temporal contrast adaptation in salamander bipolar cell. J Neurosci. 21, 9445-9454 (2001).
- Armstrong-Gold, C., &, R. i. e. k. e., F, . Bandpass filtering at the rod to second-order cell synapse in salamander (Ambystoma tigrinum) retina. J Neurosci. 23, 3796-3806 (2003).
- Masland, R. H. The fundamental plan of the retina. Nat Neurosci. 4, 877-886 (2001).
- Wassle, H. Parallel processing in the mammalian retina. Nat Rev Neurosci. 5, 747-757 (2004).
