本文介绍了如何正确使用BioRad公司赫利奥斯基因枪引入洋葱表皮细胞的质粒DNA,以及如何测试基于双分子荧光互补的原则(附设)洋葱细胞中的蛋白质 – 蛋白质相互作用
在不同生物体的基因功能的研究依赖于基因产物如何彼此互动在正常的细胞环境的知识。双分子荧光互补(附设)含量<sup> 1</sup>,使研究人员能够可视化在活细胞内蛋白质相互作用,并已成为一个重要的研究工具。此法是基于两个片段的一种荧光蛋白(GFP)的,每一个融合到一个潜在的相互作用蛋白伙伴促进协会。两个蛋白合作伙伴的互动,将有利于协会的N端和C -末端片段的GFP,导致荧光。对于植物的研究人员,洋葱表皮细胞是一种理想的实验系统进行,因为在获得和准备洋葱组织的易用性和最小的背景荧光的荧光直接可视化的附设实验。赫利奥斯基因枪(BioRad公司)是常用的轰击洋葱细胞的质粒DNA。我们证明使用赫利俄斯基因枪引入两个相互作用的质粒结构<em>拟南芥</em>转录因子,苏斯(SEU)和LEUNIG同源(LUH)<sup> 2</sup>和它们之间的相互作用附设在洋葱表皮细胞介导的可视化。
The authors have nothing to disclose.
我们感谢博士。史蒂夫和晓宁张山的35S::GFP pGlowbug构造的Hokensen Z。欧莱雅的实验室研究到CH的博士后研究是由美国国家科学基金会(IOB0616096和MCB0744752)支持。 ZL是由美国马里兰大学农业试验站的部分支持。