Il cordone ombelicale sono utilizzate per isolare le cellule muscolari lisce per vie diverse. In questo lavoro abbiamo usato il trattamento enzimatico per isolato cellule muscolari lisce.
Abstract
Il cordone ombelicale umano (UC) è un campione biologico che può essere facilmente ottenuto solo dopo la nascita. Questo campione biologico è, il più delle volte, scartati e la loro raccolta non comporta alcun rischio aggiuntivo per la salute neonato o la madre s. Inoltre non sono preoccupazioni etiche sollevate. L'UC è composto da una vena e due arterie da cui entrambe le cellule endoteliali (EC)<sup> 1</supCellule muscolari> e liscia (SMC)<sup> 2</sup>, Due dei principali componenti cellulari dei vasi sanguigni, può essere isolato. In questo progetto la SMC sono stati ottenuti dopo il trattamento enzimatico delle arterie UC di conseguenza la procedura sperimentale descritta da Jaffe<em> Et al</em<sup> 3</sup>. Dopo l'isolamento delle cellule sono stati tenuti in t-flash con DMEM-F12 integrato con il 5% di siero fetale bovino e sono state coltivate per diversi passaggi. Cellule mantenuto le loro caratteristiche morfologiche e fenotipiche altri nelle generazioni diverse. Lo scopo di questo studio è stato quello di isolare le cellule muscolari lisce al fine di utilizzarli come modelli per le analisi future con farmaci constrictor, isolare e caratterizzare strutturalmente di tipo L canali del calcio, per studiare gli aspetti cellulari e molecolari della funzione vascolare<sup> 4</sup> E di utilizzarli in ingegneria dei tessuti.
Protocol
Arterie sono ottenuti da pezzi di UC di 3-7 cm. Gelatina di Wharton che circonda le arterie è stato accuratamente rimosso tagliandolo con le forbici. Un brusco-end ago di un diametro esterno di 0.6-1mm è stato inserito 7 mm circa da una estremità delle arterie sezionato. Per rimuovere il sangue residuo all'interno dei vasi, le arterie sono tenute in verticale e perfusi con, circa 20 a 40 ml, soluzione fisiologica (PSS), utilizzando una siringa da 20 ml collegata ad un ago. Se necessario, questa fase…
Discussion
Le SMC possono essere utilizzati come modelli per i test futuri con farmaci constrictor, di isolare e caratterizzare strutturalmente di tipo L canali del calcio, per studiare gli aspetti cellulari e molecolari della funzione vascolare e di utilizzarli in ingegneria dei tessuti. SMC e EC sono fondamentali per lo sviluppo di nuovi biomateriali che possono essere utilizzati per la produzione di semi vasi sanguigni sintetici da utilizzare negli esseri umani.
Acknowledgements
Ospedale Amato Lusitano, Castelo Branco in Portogallo. Ospedale Sousa Martins, Guarda il Portogallo.
Ribeiro, M. P., Relvas, R., Chiquita, S., Correia, I. J. Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells (HUASMC). J. Vis. Exp. (41), e1940, doi:10.3791/1940 (2010).