Die Nabelschnur werden verwendet, um Zellen der glatten Muskulatur durch verschiedene Arten zu isolieren. In dieser Arbeit verwendet die enzymatische Behandlung zu isolierten glatten Muskelzellen.
Abstract
Die menschliche Nabelschnur (UC) ist eine biologische Probe, die einfach nur nach der Geburt erreicht werden kann. Diese biologische Probe, die meiste Zeit, verworfen, und ihre Erhebung bedeutet keine zusätzliche Gefahr für das Neugeborene oder die Mutter die Gesundheit. Außerdem keine ethischen Bedenken erhoben werden. Der UC wird von einer Vene und zwei Arterien, von denen beide Endothelzellen (ECs) zusammen<sup> 1</sup> Und glatten Muskelzellen (SMC)<sup> 2</sup> Lassen sich zwei der wichtigsten zellulären Komponenten der Blutgefäße, isoliert werden. In diesem Projekt werden die SMCs wurden nach enzymatischer Behandlung der UC Arterien entsprechend den experimentellen Verfahren zuvor von Jaffe beschrieben, erhalten<em> Et al</em<sup> 3</sup>. Nach Zellisolation waren sie in t-Blitz mit DMEM-F12 mit 5% fötalem Rinderserum und wurden für mehrere Passagen kultiviert gehalten. Zellen behielten ihre morphologischen und andere phänotypische Merkmale in den verschiedenen Generationen. Das Ziel dieser Studie war es, Zellen der glatten Muskulatur zu isolieren, um sie als Modelle für zukünftige Tests mit constrictor Drogen, zu isolieren und strukturell charakterisieren L-Typ Calcium-Kanälen, um zelluläre und molekulare Aspekte der vaskulären Funktion zu untersuchen<sup> 4</sup> Und sie in das Tissue Engineering verwenden.
Protocol
Arterien sind von UC Stücke von 3-7 cm erreicht. Wharton Sulze, dass die Arterien umgibt wurde sorgfältig durch Schneiden mit der Schere entfernt. A blunt-end Nadel aus einem äußeren Durchmesser von 0,6-1mm war ca. 7mm von einem Ende des seziert Arterien eingesetzt. So entfernen Sie das verbleibende Blut in den Gefäßen sind die Arterien senkrecht gehalten und perfundierten mit etwa 20 bis 40 mL, physiologischer Kochsalzlösung (PSS), mit einem 20-ml-Spritze verbunden mit einer Nadel. Wenn nötig, wur…
Discussion
Die SMC kann als Modell für zukünftige Tests mit constrictor Drogen verwendet werden, zu isolieren und strukturell charakterisieren L-Typ Calcium-Kanälen, um zelluläre und molekulare Aspekte der vaskulären Funktion zu untersuchen und sie in das Tissue Engineering verwenden. SMCs und ECs sind für die Entwicklung von neuen Biomaterialien, die in die Produktion von Halbzeugen synthetische Blutgefäße beim Menschen eingesetzt werden eingesetzt werden können fundamental.
Ribeiro, M. P., Relvas, R., Chiquita, S., Correia, I. J. Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells (HUASMC). J. Vis. Exp. (41), e1940, doi:10.3791/1940 (2010).