Die Bestimmung der Reaktivität und Titre von Serum mit einem Hämagglutinations Assay

Summary

Hämagglutinations ist eine Form der Agglutination, wo Antikörper binden an roten Blutkörperchen. Rote Blutkörperchen sind beide verfügbar und die Ergebnisse sind leicht beobachtbaren mit dem bloßen Auge. Dieses Video zeigt die Schritte in einer Hämagglutination Test beteiligt sind, die Interpretation der Ergebnisse und die Bestimmung der Titer.

Abstract

Hämagglutinations ist eine spezifische Form der Agglutination und wird verwendet, wenn Antikörper gegen rote Blutkörperchen, die als Partikel Antigen wirken zu binden. Rote Blutkörperchen sind besonders nützlich, Ziele, da sie leicht verfügbar sind und die Agglutination zu beobachten ist mit dem bloßen Auge. Diese Technik wird häufig verwendet, um den Titer eines Antikörpers (Ab), für die Blutgruppenbestimmung und virale Quantifizierung zu bestimmen. In diesem Video werden die Schritte bei der Vorbereitung und Durchführung einer Hämagglutination Test beteiligten demonstriert mit spezifischen Antikörpern gegen Blutgruppe A-Antigene hinzugefügt, um rote Blutkörperchen (Revercells). Das Antiserum wird seriell in eine 96-Well U-Boden Mikrotiterplatten Tablett verdünnt, an dem eine Aussetzung der Revercells aufgenommen. Die Proben werden gemischt und dann bei 37 ° C für 60 Minuten. Nach dieser Zeit können die Proben dann leicht ve, + ve und Zwischenprodukte (-/+) Hämagglutination Reaktionen erzielt werden. Dieser Ansatz ermöglicht die Reaktivität und die Titer von einer Serumprobe zu beurteilen mit einem schnellen und einfachen Technik. Das Video nimmt die Theorie hinter der Test, wie die Ergebnisse gelesen und interpretiert, wie der Titer bestimmt wird, wie der Test geändert werden können und alle Probleme mit dem Einsatz dieser Technik verbunden sind.

Protocol

Vorbereitung von 5x Veronal Buffered Saline (VBS) Zur Vorbereitung der Veronal-gepufferte Kochsalzlösung (VBS), müssen drei separate Lösungen vorbereitet werden. Bereiten Sie die Lösung 1 durch Auflösen 21.25gm von NaCl und 0.94gm von Sodium barbiturathaltiges Mittel in 350ml destilliertem Wasser. Die Endkonzentrationen der NaCl und Natrium barbiturathaltiges Mittel sind 1,02 M und 13mm bzw.. Bereiten Sie die Lösung 2 durch Lösen 1.44gm von barbiturathaltiges Mittel in 125ml destill…

Discussion

Die Hämagglutination-Assay ist eine sehr einfache Technik, die für eine große Anzahl von Serumproben, um innerhalb kurzer Zeit beurteilt werden können. Es hat auch den Vorteil, dass ohne die Notwendigkeit spezieller Ausrüstung zu lesen, mit dem Auge geeignet. Diese Technik kann auch für den Nachweis von humanem Chorion-Gonadotropin Hormon im Urin modifiziert werden, als Teil einer Hämaglutinationshemmungstest. In Bezug auf einen Standard Hämagglutinationstest, es gibt ein paar Bereiche, in denen darauf zu, um f?…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Revercells		CSL	02490201	Use at 1% final
Anti-A serum		CSL	02611305
96 well U bottom plate		TRP	92097	Must be U-bottom
Veronal buffered saline				Use at 1x final
37°C room/incubator
Disposable gloves