Het bepalen van de reactiviteit en de titer van Serum met behulp van een hemagglutinatie Assay

Summary

Hemagglutinatie is een vorm van agglutinatie waar antilichamen binden aan rode bloedcellen. Rode bloedcellen zijn zowel direct beschikbaar en de resultaten zijn gemakkelijk waarneembare met het blote oog. Deze video toont de stappen die betrokken zijn bij een hemagglutinatie assay, het interpreteren van de resultaten en het bepalen van de titer.

Abstract

Hemagglutinatie is een specifieke vorm van agglutinatie en wordt gebruikt wanneer antilichamen binden aan de rode bloedcellen, die fungeren als een fijn antigeen. Rode bloedcellen zijn bijzonder nuttig doelen zoals ze zijn direct beschikbaar en agglutinatie is waarneembaar met het blote oog. Deze techniek wordt vaak gebruikt om de titer van een antilichaam (Ab), voor bloedgroepen en virale kwantificering te bepalen. In deze video, is de stappen die betrokken zijn bij de voorbereiding en het uitvoeren van een hemagglutinatie assay aangetoond met behulp van antilichamen die specifiek zijn voor bloedgroep A-antigenen toegevoegd aan rode bloedcellen (Revercells). Het antiserum is serieel verdund in een 96 wells U-bodem microtiterplaten tray, waaraan is toegevoegd een suspensie van Revercells. De monsters worden gemengd en vervolgens geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 60 minuten. Na deze tijd kan de samples dan gemakkelijk worden gescoord voor ve, + ve en intermediaire (-/+) hemagglutinatie reacties. Deze aanpak maakt het mogelijk om reactiviteit en titer van een serum monster te worden beoordeeld met behulp van een snelle en eenvoudige techniek. De video zal betrekking hebben op de theorie achter de test, hoe de resultaten worden gelezen en geïnterpreteerd, hoe de titer te bepalen, hoe de test kan worden gewijzigd en alle kwesties in verband met het gebruik van deze techniek.

Protocol

De voorbereiding van 5x Veronal Buffered Saline (VBS) Ter voorbereiding van de Veronal gebufferde fysiologische zoutoplossing (VBS), drie afzonderlijke oplossingen moeten worden voorbereid. Maak een oplossing een door het oplossen van 21.25gm van NaCl en 0.94gm van natrium Barbitone in 350 ml gedestilleerd water. De uiteindelijke concentratie van de NaCl en Natrium Barbitone zijn 1,02 m en 13 mm respectievelijk. Maak een oplossing 2 door het oplossen van 1.44gm van Barbitone in 125 ml warm…

Discussion

De hemagglutinatie test is een zeer eenvoudige techniek die het mogelijk maakt voor een groot aantal van de serum monsters worden beoordeeld in een korte periode van tijd. Het heeft ook het voordeel dat het lezen zonder de noodzaak voor gespecialiseerde apparatuur, met de ogen geschikt zijn. Deze techniek kan ook worden aangepast voor de detectie van humaan chorion gonadotrofine hormoon in de urine aanwezig is, als onderdeel van een hemagglutinatieremmingstest. Met betrekking tot een standaard hemagglutinatie-test, zijn…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Revercells		CSL	02490201	Use at 1% final
Anti-A serum		CSL	02611305
96 well U bottom plate		TRP	92097	Must be U-bottom
Veronal buffered saline				Use at 1x final
37°C room/incubator
Disposable gloves