Bu yazıda, UV öldürüldü bakteriyel gıda ile sağlam bir medya üzerinde muhafaza nematod ömrü ölçmek için genel bir protokol mevcut.
Yaşlanma, hücresel bileşenleri ve ölüm ile sonuçlanan organelleri ilerleyici bir bozulma ile karakterize dejeneratif bir süreç. Nematod<em> Caenorhabditis elegans</em> Yaşlanma biyolojisi okumak için kullanılan bir ana model olarak ortaya çıkmıştır. Hemen hemen her biyolojik alt sistemi, artan yaş ile fonksiyonel düşüş uğrar Çünkü yaşlanma toplam oranı göz önüne alındığında, ömrü ilgi birincil son nokta. Nematod, ömrü genellikle bir hayvan dış uyaranlara yanıt kalır gün sayısı olarak tanımlanır. Nematodlar ya da sıvı ortamda veya plakalar katı ortam üzerinde yayılır olabilir ve her şartlar altında ömrü ölçüm teknikleri geliştirilmiştir. Burada katı nematod büyüme ortamı devam nematod ömrü ölçmek için genelleştirilmiş bir protokol mevcut ve UV-öldürülmüş bakteri bir diyetle beslenen. Bu prosedürler kolayca canlı bakteri, diyet kısıtlaması, ve RNA girişim oluşan bir diyet de dahil olmak üzere, çeşitli ortak koşullar altında tahlil ömrü adapte olabilir.
Uzun ömürlü genetik kontrol C. yaygın olarak incelenmiştir elegans, büyük ölçüde ömrü tespit edilebilir olan kolaylığı ve hızı nedeniyle. Bu makalede açıklanan protokol C. tekrarlanabilir ömrü veri elde etmek için temel bir çerçeve tanımlar elegans ve relatednematode türler için de uygulanabilir. 2, bu işlemler çok çeşitli şartlar altında ömrü ölçmek için adapte edilebilir basit bazı değişiklikler yaparak . Burada RNA enterferans (RN…
Bu çalışma Gerontoloji Ödülü ve NIH Hibe MKGS 1R01AG031108-01, Ulusal Sağlık Enstitüsü, eğitim hibe P30AG013280 tarafından desteklenen bir Glenn / Afar buluşlar tarafından desteklenmiştir. MK Yaşlanma Ellison Tıp Vakfı Yeni Scholar.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Agar | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0145-17-0 (214530) | |
Ampicillin | Reagent | MidSci | 0339 | |
BactoTryptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0123-17-3 (211705) | |
BactoPeptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0118-17-0 (211677) | |
CaCl2 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9699248 (1332-01) | |
Carbenicillin | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | C0109 | |
Cholesterol | Reagent | Sigma-Aldrich | C75209 | |
Fluorodeoxyuridine (FUDR) | Reagent | Sigma-Aldrich | F0503 | |
Isopropyl β-d-Thiogalactopyranoside (IPTG) | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | I2481C5 | |
KPi Dibasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087862 (3252-01) | |
KPi Monobasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087861 (3246-01) | |
MgSO4 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9561800 (2500-01) | |
NaCl | Reagent | Fisher Scientific | S251 | |
Tris | Reagent | Sigma-Aldrich | T1503 | |
Yeast Extract | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0886-17-0 (288620) |