В этой статье мы представляем общий протокол для измерения продолжительности жизни нематод поддерживается на твердых средах с УФ-убил бактериальной пищи.
Старение является дегенеративный процесс характеризуется прогрессирующей деградации клеточных компонентов и органелл в результате чего смертность. Нематоды<em> Caenorhabditis Элеганс</em> Стала основной модели используются для изучения биологии старения. Потому что практически все биологические подсистемы проходит функциональные расстройства с увеличением возраста, продолжительность жизни первичной конечной точки интереса при рассмотрении суммарная скорость старения. У нематод, продолжительность жизни, как правило, определяется как количество дней животное остается реагировать на внешние раздражители. Нематоды могут распространяться либо в жидких средах или на твердой среде в виде пластин, и методы были разработаны для измерения продолжительности жизни при обоих условиях. Здесь мы представляем обобщенные протокол для измерения продолжительности жизни нематод поддерживается на твердой питательной среды нематоды и подается питание УФ-убитых бактерий. Эти процедуры могут быть легко адаптированы для анализа продолжительности жизни в различных распространенных заболеваний, в том числе диета, состоящая из живых бактерий, диетические ограничения, и РНК-интерференции.
Генетического контроля долголетия хорошо изучена в C. Элеганс, во многом благодаря простоте и быстроте, с которой продолжительность жизни может быть определена. Протокол обсуждается в этой статье описываются основные рамки для получения воспроизводимых жизни данных на языке C. …
Эта работа была поддержана Гленн / АФАР Открытия в премии геронтологии и NIH Грант 1R01AG031108-01 к MKGS поддерживается NIH обучение грант P30AG013280. МК Эллисон Медицинский фонд Новый ученый в процессе старения.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Agar | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0145-17-0 (214530) | |
Ampicillin | Reagent | MidSci | 0339 | |
BactoTryptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0123-17-3 (211705) | |
BactoPeptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0118-17-0 (211677) | |
CaCl2 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9699248 (1332-01) | |
Carbenicillin | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | C0109 | |
Cholesterol | Reagent | Sigma-Aldrich | C75209 | |
Fluorodeoxyuridine (FUDR) | Reagent | Sigma-Aldrich | F0503 | |
Isopropyl β-d-Thiogalactopyranoside (IPTG) | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | I2481C5 | |
KPi Dibasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087862 (3252-01) | |
KPi Monobasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087861 (3246-01) | |
MgSO4 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9561800 (2500-01) | |
NaCl | Reagent | Fisher Scientific | S251 | |
Tris | Reagent | Sigma-Aldrich | T1503 | |
Yeast Extract | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0886-17-0 (288620) |