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Investigando o Metabolismo Cardíaco no Coração de Rato Perfundido Isolado com Piruvato Hiperpolarizado [1-13C]Piruvato e Espectroscopia de RMN 13C/31P
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Biology
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JoVE Journal Biology
Investigating Cardiac Metabolism in the Isolated Perfused Mouse Heart with Hyperpolarized [1-13C]Pyruvate and 13C/31P NMR Spectroscopy
DOI:

14:56 min

April 21, 2023

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Chapters

  • 00:03Introduction
  • 01:17Krebs-Henseleit Buffer Preparation
  • 01:45Perfusion System Preparation
  • 02:29Calibration and Preparation of the NMR Spectrometer for Acquisition
  • 03:22Animal Preparation, Surgical Procedure, and Perfusion of the Heart in the NMR Tube
  • 09:23Acquiring Data for Cardiac Energetics and pH
  • 10:09DNP Spin Polarization and Dissolution
  • 11:25Hyperpolarized 13C Spectroscopy
  • 12:07Representative Results
  • 14:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Descrevemos uma configuração experimental para administrar metabólitos hiperpolarizados marcados com 13C no modo de perfusão contínua a um coração de rato perfundido isolado. Uma abordagem dedicada à aquisição de 13C-NMR permitiu a quantificação da atividade enzimática metabólica em tempo real, e uma análise multiparamétrica de 31P-NMR permitiu a determinação do conteúdo de ATP tecidual e do pH.

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