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Fixation et isolement rapides in vivo de complexes translationnels à partir de cellules eucaryotes
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Rapid In Vivo Fixation and Isolation of Translational Complexes from Eukaryotic Cells
DOI:

14:29 min

December 25, 2021

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Chapters

  • 00:10Introduction
  • 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
  • 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
  • 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 11:02Results
  • 13:41Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous présentons une technique pour stabiliser rapidement les complexes translationnels (biosynthèse des protéines) avec réticulation du formaldéhyde dans les cellules de levures et de mammifères vivantes. L’approche permet de disséquer les intermédiaires transitoires et les interactions dynamiques ARN:protéine. Les complexes réticulés peuvent être utilisés dans de multiples applications en aval telles que les méthodes de profilage basées sur le séquençage en profondeur, la microscopie et la spectrométrie de masse.

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