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Análisis de espectrometría de masas para identificar la ubiquitylación de CENP-A con etiqueta EYFP (EYFP-CENP-A)
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Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)
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Análisis de espectrometría de masas para identificar la ubiquitylación de CENP-A con etiqueta EYFP (EYFP-CENP-A)

DOI:
10.3791/61138-v

•

09:02 min

•

June 10, 2020

•

, , , , , , ,
1MOE Key Laboratory of Model Animal for Disease Study, Model Animal Research Center,Nanjing University, 2Jiangsu Key Laboratory of Molecular Medicine,Medical School of Nanjing University, 3Greehey Children’s Cancer Institute, Department of Molecular Medicine,UT Health Science Center San Antonio

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:44In Vivo Ubiquitylation Assays Using pQCXIP-EYFP-CENP-A
  • 02:19Mass Spectrometry to Identify the Ubiquitylation Site of the EYFP-CENP-A K124R Mutant
  • 04:55Data Analysis
  • 06:22Results: EYFP-CENP-A K124 Mutant is Ubiquitylated and Interacts with HJURP
  • 08:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

La ubicuidad CENP-A es un requisito importante para la deposición CENP-A en el centromere, heredada a través de la dimerización entre la división celular, e indispensable para la viabilidad celular. Aquí describimos el análisis de espectrometría de masas para identificar la ubiculación de la proteína CENP-A (EYFP-CENP-A) etiquetada por EYFP.

Tags

Mass SpectrometryUbiquitylationEYFP-CENP-AProtein IdentificationImmunoprecipitationGFP AntibodyLysate PreparationGel ElectrophoresisCoomassie Blue StainingProtein DigestionMass Spectrometry Analysis

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