A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:42Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification
- 01:40STTM Purification
- 02:22T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation
- 03:13Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction
- 04:55T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning
- 07:21Potato Virus-X-Based VbMS Assay
- 10:07Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species
- 11:16Conclusion
We presenteren een gedetailleerd protocol voor het op aardappelvirus X (PVX) gebaseerde microRNA-uitschakelingssysteem (VbMS) om endogene microRNA's (miRNA's) in aardappelen functioneel te karakteriseren. Target mimic (TM) moleculen van miRNA van belang worden geïntegreerd in de PVX-vector en tijdelijk uitgedrukt in aardappel om de doel miRNA- of miRNA-familie tot zwijgen te brengen.
