Journal
/
/
מכוונת ציסטאין תיולים במבחנה גליקוזילציה בייעודי לאתר של חומרים
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Targeting Cysteine Thiols for in Vitro Site-specific Glycosylation of Recombinant Proteins
DOI:

11:25 min

October 04, 2017

, , , , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
  • 03:44Uniform 15N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
  • 05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
  • 07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
  • 08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
  • 10:11Conclusion

Summary

Automatic Translation

ניתוחים הביוכימי ומבניים של חלבונים glycosylated דורשים כמויות גדולות יחסית של דגימות הומוגנית. כאן, אנו מציגים שיטה כימית יעילה עבור גליקוזילציה בייעודי לאתר של חומרים מטוהרים של חיידקים על ידי מיקוד תיולים Cys תגובתי.

Related Videos

Read Article