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Study of Endoplasmic Reticulum and Mitochondria Interactions by In Situ Proximity Ligation Assay in Fixed Cells
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Etude de réticulum endoplasmique et mitochondries Interactions par<em> In Situ</em> Proximité Ligation Assay dans des cellules fixes

DOI:
10.3791/54899-v

•

09:34 min

•

December 10, 2016

•

,
1Lund University Diabetes Centre,Lund University, 2INSERM UMR-1060, CarMeN Laboratory, Lyon 1 University, INRA U1235, INSA of Lyon,Rockefeller and Charles Merieux Lyon-Sud Medical Universities

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:42Fixation and Blocking of Cells
  • 03:46Primary Antibodies and Proximity Ligation Assay Probes
  • 06:09Amplification and Imaging Preparation
  • 07:48Results: In Situ Proximity Ligation Assay in HuH7 Cells
  • 08:52Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Ici, nous décrivons une procédure pour visualiser et de quantifier avec une grande sensibilité les interactions endogènes entre le réticulum endoplasmique et les mitochondries dans les cellules fixes. Le protocole optimisé comprend un essai de ligature de proximité in situ dans le ciblage de l'inositol 1,4,5-triphosphate récepteur / protéine régulée par le glucose 75 / D complexe canal anionique / cyclophiline dépendant de la tension à l'interface de la membrane associée à la mitochondrie.

Tags

Endoplasmic ReticulumMitochondriaIn Situ Proximity Ligation AssayFixed CellsVDAC1IP3R1Mitochondrial Associated MembraneImmunofluorescenceBiomedical ResearchCell FixationCell PermeabilizationBlockingImmunostaining

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