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Implementing Patch Clamp and Live Fluorescence Microscopy to Monitor Functional Properties of Freshly Isolated PKD Epithelium

Implementando Grampo patch e ao vivo microscopia de fluorescência para monitorar propriedades funcionais de recentemente isolados PKD Epithelium

DOI:
10.3791/53035-v

•

08:46 min

•

September 01, 2015

•

, , , , ,
1Department of Physiology,Medical College of Wisconsin, 2Department of Integrative Biology & Pharmacology,University of Texas Health Science Center at Houston

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:14Isolation of Renal Cysts and Connecting Tubules/Collecting Duct Segments
  • 05:02Single Channel Patch-clamp Electrophysiology
  • 05:32Ratiometric Epifluorescence Measurement of Intracellular Calcium Concentration in the Epithelial Cells
  • 06:55Results: Effect of Benzamil Treatment and ATP in the Cystic Cells of PCK Rats
  • 08:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Canais de iões expressas em epitélio tubular renal, desempenha um papel significativo na patologia da doença poliquística do rim. Aqui nós descrevemos protocolos experimentais utilizados para a realização de análises e medições de nível de cálcio intracelular de patch-clamp no epitélio cístico recentemente isoladas de rins de roedores.

Tags

Patch ClampLive Fluorescence MicroscopyPolycystic Kidney DiseasePKDARPKDIon ChannelsCalcium SignalingEpithelial MonolayerEx Vivo AnalysisPCK RatSprague Dawley RatNative SettingEpithelial IsolationImmunostainingPrimary CultureBiochemical Assays

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