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Generazione e Purificazione di umani INO80 rimodellamento della cromatina Complessi e Sottocomplessi
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Generation and Purification of Human INO80 Chromatin Remodeling Complexes and Subcomplexes
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Generazione e Purificazione di umani INO80 rimodellamento della cromatina Complessi e Sottocomplessi

DOI:
10.3791/51720-v

•

08:44 min

•

October 23, 2014

•

, , ,
1Stowers Institute for Medical Research, 2Department of Biochemistry & Molecular Biology,Kansas University Medical Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:23Isolation of Nuclei
  • 02:45Extracting Nuclei with Salt
  • 04:38Immunoaffinity Purification of the Human INO80 or INO80 Subcomplexes
  • 06:53Results: Analysis of the Composition of Immunopurified INO80 Complexes and Subcomplexes
  • 08:01Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Questo protocollo descrive una procedura per la generazione e purificare wild type e mutanti versioni del complesso rimodellamento della cromatina INO80 umana. Epitopi tagged versioni di subunità INO80 sono stabilmente espressi in cellule HEK293 e complessi completi e complessi privi di specifici gruppi di subunità sono purificati mediante cromatografia di immunoaffinità.

Tags

INO80 Chromatin Remodeling ComplexNucleosome DynamicsDNA AccessibilityATP-dependent Nucleosome RemodelingIno80 ATPaseFLAG-tagged Ino80HEK 293 CellsSiRNA DepletionFLAG ImmunoprecipitationSubcomplexesMass SpectrometryChromatin Remodeling Assays

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