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siRNA Screening to Identify Ubiquitin and Ubiquitin-like System Regulators of Biological Pathways in Cultured Mammalian Cells
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siRNA contrôle pour la ubiquitine et les régulateurs du système ubiquitine-comme des voies biologiques dans des cellules de mammifères en culture

DOI:
10.3791/51572-v

•

10:43 min

•

May 24, 2014

•

, , , ,
1MRC Protein Phosphorylation and Ubiquitylation Unit, College of Life Sciences,University of Dundee, 2Centre for Gene Regulation and Expression, College of Life Sciences,University of Dundee

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:22Characterizing Hypoxia-responsiveness to Develop the Assay
  • 04:18Primary Screen: First Day
  • 07:27Primary Screen: Subsequent Days
  • 08:27Sample Screen
  • 10:09Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Ici, nous décrivons une méthode pour effectuer un siRNA ciblés écran "ubiquitome" pour identifier de nouveaux régulateurs de l'ubiquitine et ubiquitine de la réponse cellulaire médiée HIF1A à l'hypoxie. Ceci peut être adapté à n'importe quelle voie biologique où une lecture robuste de l'activité du rapporteur est disponible.

Tags

SiRNA ScreeningUbiquitinUbiquitin-like SystemBiological PathwaysMammalian CellsPost-translational ModificationUbiquitomeHIF1AHypoxia ResponseTranscription-based Luciferase ReporterAssay DevelopmentPrimary ScreeningSecondary ScreeningTertiary/deconvolution ScreeningTargeted SiRNA LibraryOff-target Effects

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