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Preparação de primário neurônios para visualizar Neuritos num Estado Frozen-hidratado Usando Cryo-Electron Tomografia
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1Department of Molecular Physiology and Biophysics,Baylor College of Medicine, 2Department of Neuroscience,Baylor College of Medicine, 3Department of Neuroscience,University of California at San Diego, 4National Center for Macromolecular Imaging, Verna and Marrs McLean Department of Biochemistry and Molecular Biology,Baylor College of Medicine
Chapters
- 00:05Title
- 01:19Preparing Dishes with EM Grids
- 03:43Preparing and Plating Primary Neurons on EM Grids
- 04:45Vitrifying Neurons on EM Grids
- 08:05Results: Visualizing Neurites in a Frozen-hydrated State Using Cryo-Electron Tomography
- 09:32Conclusion
Para preservar processos neuronais para análise ultra-estrutural, nós descrevemos um protocolo para revestimento dos neurônios primários em grades de microscopia eletrônica seguido de congelamento flash, rendendo amostras suspensas em uma camada de gelo vítreo. Essas amostras podem ser examinadas com um microscópio crio-eletrônico para visualizar estruturas em escala nanométrica.
