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Marcatura metabolica di RNA recentemente trascritto per Alta Risoluzione profili di espressione genica di RNA di sintesi, trattamento e Decay in coltura cellulare
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Biology
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JoVE Journal Biology
Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA for High Resolution Gene Expression Profiling of RNA Synthesis, Processing and Decay in Cell Culture
DOI:

11:00 min

August 08, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:44Metabolic Labeling with 4-thiouridine
  • 03:05Thiol-specific Biotinylation of Newly Transcribed RNA
  • 05:09Separation of Labeled and Unlabeled RNA Using Streptavidin-coated Magnetic Beads
  • 07:00Recovery of Newly Transcribed RNA
  • 08:17Results: Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA
  • 10:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

L'RNA cellulare totale fornisce un modello povero per studiare variazioni a breve termine in sintesi dell'RNA e il decadimento nonché la cinetica di RNA processing. Qui, descriviamo marcatura metabolica di RNA trascritto recente con 4 thiouridine seguito da biotinylation tiolo-specifica e purificazione dell'RNA trascritto appena consentano di superare queste limitazioni.

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