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A Plataforma de Produção de Proteína Complexo MultiBac no EMBL
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Biology
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JoVE Journal Biology
The MultiBac Protein Complex Production Platform at the EMBL
DOI:

13:51 min

July 11, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:13Tandem Recombineering (TR) for Creating Multigene Expression Constructs
  • 04:57Composite Multigene Baculovirus Generation, Amplification and Storage
  • 05:02Baculovirus Generation
  • 06:42Amplification
  • 08:14Storage
  • 08:55Protein Production and Downstream Processing
  • 08:57Infecting Larger Cultures and Monitoring YFP
  • 10:20Cell Lysis and Fractionation
  • 10:45Protein Purification
  • 11:07Future Outlook
  • 11:33Results: Production of Eukaryotic Protein Complexes by MultiBac
  • 12:18Conclusion

Summary

Automatic Translation

Complexos proteína de catalisar as funções celulares importantes. Caracterização estrutural e funcional detalhada de muitos complexos essenciais exige a produção recombinante. MultiBac é um sistema de células de baculovirus / insecto particularmente adaptado para a expressão de proteínas eucarióticas e seus complexos. MultiBac foi implementado como uma plataforma de acesso aberto, e procedimentos operacionais padrão desenvolvidos para maximizar a sua utilidade.

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