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1Department of Pharmacology & Chemical Biology,University of Pittsburgh School of Medicine, 2Hillman Cancer Center,University of Pittsburgh Cancer Institute, 3Department of Experimental Therapy,The Netherlands Cancer Institute, 4Department of Human Genetics,University of Pittsburgh School of Public Health
Chapters
- 00:05Title
- 02:53Molecular Beacon Design
- 04:31Nuclear Lysate Preparation
- 08:31Molecular Beacon Assay
- 11:51Representative Analysis of Tumor Cell Lysates
- 13:54Conclusion
Nós descrevemos um método para a quantitativa, a medição em tempo real de DNA glicosilase e as actividades de endonucleases de AP em células lisados nucleares. O ensaio produz taxas de actividade de reparação de ADN passíveis de análise cinética e é adaptável para a quantificação da actividade de reparação de ADN em tecido e lisados tumorais ou com proteínas purificadas.
Tags
Quantitative AnalysisReal-time MeasurementBase Excision RepairDNA GlycosylaseAP EndonucleaseMolecular BeaconsSubstrateDeoxyoligonucleotideCarboxyfluorescein (6-FAM)DabcylStem-loop StructureNucleotidesBase PairsFörster Resonance Energy Transfer (FRET)FluorescenceDNA RepairFluorescence ValuesReal-time AssessmentPCR Instruments
