A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 02:02Preparation of Brain Homogenate and Detergent Soluble and Insoluble Fractions
- 03:21Velocity Sedimentation in Sucrose Step Gradients
- 04:30Size Exclusion Chromatography
- 06:16Capture of PrP with g5P and Western Blotting
- 08:20Representative PrP Isolation Results
- 10:45Conclusion
Une nouvelle espèce de protéine prion cellulaire (PrP<sup> C</sup>) A été récemment identifié dans les cerveaux humains non infectés en utilisant les méthodes décrites ici. Ces méthodes peuvent être utilisées pour isoler des espèces différentes PrP, alors que certains d'entre eux sont également utile pour isoler des agrégats de protéines mal repliées autres à partir de cerveaux humains.
Tags
Soluble PrP OligomersInsoluble PrP OligomersNormal Human BrainPrPCPrPScDetergent-solubleProteinase K (PK)-digestionDetergent-insoluble AggregatesConformational Transitionα-helical Structuresβ-sheet StructuresEndogenous PrPScIntermediate PrPSilent PrionBiophysical ApproachesBiochemical ApproachesUltracentrifugationSucrose Step Gradient SedimentationSize Exclusion ChromatographyIPrP EnrichmentGene 5 Protein (g5p)PK-treatment
